大连美仑生物技术有限公司

Apoptosis Bcl-2 Bcl-6 Caspase Ferroptosis Mdm2 p53 RIP kinase Survivin TNF-alpha Cuproptosis IAP Metabolic Enzyme/Protease PDHK ROS Kinase Phosphatase MDM-2/p53 Kinesin PKC HSP Autophagy TNF Receptor FKBP Bcl-2 Family Pyroptosis DAPK PKD EBV Glutathione Peroxidase Transferrin Receptor c-Myc Necroptosis ASK1 Thymidylate Synthase

Autophagy

Autophagy LRRK2 Estrogen/progestogen PINK1/Parkin Dynamin Anti-infection Oxidative Phosphorylation Akt AMPK JAK Toll-like Receptor (TLR) ULK p62 Atg8/LC3 Atg7 Atg4 AUTACs

Epigenetics

DNA Methyltransferase DNMT Epigenetic Reader Domain Histone Acetyltransferase Histone demethylases Histone Methyltransferase PKC AMPK HDAC JAK MicroRNA Protein Arginine Deiminase Phosphodiesterase (PDE)

GPCR/G Protein

Adenosine Receptor Angiotensin Receptor Cannabinoid Receptor CaSR E1 Activating CRFR E2 conjugating E3 Ligase Endothelin Receptor GHSR Glucagon Receptor GLP-1R GPCR19(TGR5) GPR GPR119 GPR40(FFAR1) Imidazoline Receptor Leukotriene Receptor LPA Receptor OX Receptor Protease-activated Receptor Rac Prostaglandin Receptor Oxytocin Receptor Ras Rho S1P Receptor Sigma Receptor 5-HT Receptor Neurokinin Receptor mAChR GCGR LPL Receptor Dopamine Receptor Guanylate Cyclase Histamine Receptor CXCR CCR GPR35 P2Y Receptor Opioid Receptor GPR68 mGluR Formyl Peptide Receptor (FPR) Platelet-activating Factor Rec GnRH Receptor Protease Activated Receptor (P Vasopressin Receptor Chemerin Receptor Melatonin Receptor MCHR1 (GPR24) Orexin Receptor (OX Receptor) RGS Protein CGRP Receptor Free Fatty Acid Receptor

Immunology/Inflammation

AhR CCR COX Complement 5(C5) CXCR Histamine Receptor IL Receptor Immunology IL-5 NOD1 IL-12 PD-1 IL-17 PDL-1 reactive oxygen species (ROS) NLRP3 TLR STING Toll-like Receptor (TLR) Bcr-Abl Salt-inducible Kinase (SIK) Glucocorticoid Receptor IRAK SphK Interleukin Related PGE synthase Macrophage migration inhibitor Complement System MyD88 FLAP Thrombopoietin Receptor Arginase NO Synthase AP-1 Nuclear Factor of activated T IFNAR CD276/B7-H3 CD3 CD38 CD28 CD22 CD20 CD19 Aryl Hydrocarbon Receptor PD-1/PD-L1 NOD-like Receptor (NLR) Mesothelin Mucin NTPDase PSMA SOD DOCK CD74 CD6 CD73 CTLA-4 CX3CR1 Cyclic GMP-AMP Synthase FAP Galectin Cyclophilin P-selectin CD2 CD47 Tim3 TROP2 Glycoprotein VI Kallikrein LAG-3 VAP-1 BCL6

Integrin

JAK-STAT/IL6

JAK STAT IL-6 Pim EGFR

MAPK

ErbB2 ERK JNK MEK p38 MAPK Mixed Lineage Kinase Raf

Membrane Transporter/Ion Chann

Amino acid transporter antagon ATPase Calcium Channel CFTR Chloride channel CRM1 GABA Receptor GluR iGluR NMDAR P-gp Potassium Channel Proton Pump SGLT Sodium Channel TRPV P-glycoprotein Na+/K+ ATPase Piezo Channel Fat Mass and Obesity-associate TRP Channel BCRP nAChR CRAC Channel Apical Sodium-Dependent Bile A P2X Receptor Monocarboxylate Transporter Na+/HCO3- Cotransporter GlyT OAT NKCC Monoamine Transporter HCN Channel EAAT Ferroportin GLUT Na+/H+ Exchanger (NHE) Na+/Ca2+ Exchanger FATP ATP Synthase ASCT VDAC Urea Transporter URAT1 Aquaporin Calmodulin

Metabolic Enzyme/Protease

5-alpha Reductase Aminopeptidase ATP-citrate lyase in Carbonic Anhydrase CETP DGAT DPP-4 Factor Xa FOX FXR Glucokinase(GK) GSNOR HCV Protease HIF HMG-CoA Reductase HSP IDO Lactate Dehydrogenase Integrase MMP NAMPT P450 PAI-1 PDE PGC-1α Phospholipase Procollagen C Protein Proteases PKM Proteasome RAR/RXR Retinoid Receptor Serine Protease Thrombin Transferase Xanthine Oxidase p38-MAPK Stearoyl-CoA Desaturase (SCD) Mitochondrial Metabolism (MPC) Tyrosinase Endogenous Metabolite Phosphatase Pyruvate Kinase PDI Phosphodiesterase (PDE) HIF/HIF Prolyl-Hydroxylase Hexokinase Ser/Thr Protease Carboxylesterase Cathepsin Cytochrome P450 Drug Metabolite E1/E2/E3 Enzyme Angiotensin-converting Enzyme HMG-CoA Reductase (HMGCR) Aldose Reductase Oxidative Phosphorylation NADPH Oxidase Lipoxygenase DAGL MAGL MALT1 Adenosine Kinase COMT Glutathione S-transferase Adenosine Deaminase Acyltransferase Enolase Aldehyde Dehydrogenase (ALDH) Farnesyl Transferase Glucosidase PDHK Fatty Acid Synthase (FASN) Dipeptidyl Peptidase Methylenetetrahydrofolate Dehy Dihydroorotate Dehydrogenase Renin FAAH SGK Dopamine β-hydroxylase HIV Integrase Adiponectin Receptor ROR LXR Mineralocorticoid Receptor REV-ERB Amine N-methyltransferase

Neuronal Signaling

5-HT Receptor AChR BACE Beta Amyloid Beta-secretase CaMK CGRP Receptor Dopamine Receptor FAAH Gamma-secretase GlyT iGluR MAO mAChR Opioid Receptor Serotonin Transporter Legumain γ-secretase Notch Monoamine Oxidase Trk Receptor Cholinesterase (ChE) Imidazoline Receptor Amyloid-β Dopamine Transporter Sigma Receptor Glucosylceramide Synthase (GCS

NF-κB

NF-κB Nrf2 IκB/IKK Reactive Oxygen Species Keap1-Nrf2 IKK RANKL/RANK

Others

Androgen Receptor Aromatase CD20 CD52 c-Myc CPT1 c-RET CTLA-4 Decarboxylase Dehydrogenase FPR GLUT Glutaminase HIV ProteaseAnti-infection HSP90 Hydroxylase IAP IgE IRE1 LDL Lipase Lipoxygenase Lysyl Hydroxylase MT Receptor NADPH oxidase others P2 Receptor PAFR PCSK9 RAAS RANK Ligand Reverse Transcriptase S6 Kinase Thioredoxin Tie-2 SARM Vasopressin Receptor VDA Vitamin D Related CDA TrxR PDE IDO

PI3K/Akt/mTOR

Akt MELK mTOR GSK-3 PDK-1 PI3K PIKfyve PTEN RSK AMPK PI4K PIN1

Protein Tyrosine Kinase/PTK

ACK ALK Axl Bcr-Abl BTK cAMP(PKA) c-Kit c-Met CSF-1R DYRK EGFR Ephrin receptor FAK FGFR FLT3 HER2 IGF-1R MET Insulin Receptor PDGFR PKA ROS Src Syk Trk receptor VEGFR

Stem Cell /Wnt

c-Jun Hedgehog/Smoothened Hippo pathway Met stemness kinase OCT Wnt/β-catenin Adenylate Cyclase YAP PKA TGF-beta/Smad Gli Wnt sFRP-1 Smo Organoid Hedgehog Porcupine PKG Hippo (MST) Oct3/4 β-catenin BMI1

TGF-beta/Smad

TGF-beta/Smad TGF-β Receptor PKC PKA

Cell Cycle/DNA Damage

Antifolate APC ATM/ATR Aurora Kinase BMI-1 Casein Kinase CDK CD38 Chk DHFR DNA alkylator DNA-PK DNA/RNA Synthesis DUB Dynamin HDAC HSP Kinesin Microtubule Associated p97 MTH1 PAK PERK PLK PPAR PARP ROCK Sirtuin RAD51 Telomerase TOPK Topoisomerase Wee1 Deubiquitinase NEKs OGG Polo-like Kinase (PLK) Microtubule/Tubulin Mps1 MASTL Haspin Kinase SRPK DNA Alkylator/Crosslinker ATF6 Checkpoint Kinase (Chk) G-quadruplex Nucleoside Antimetabolite/Anal Eukaryotic Initiation Factor ( CRISPR/Cas9 IRE1 MARK Epoxide Hydrolase

Protein Tyrosine Kinase/RTK

TAM Receptor ROS Kinase JAK Src VEGFR c-Met Syk ALK FAK IGF-1R FLT3 c-Met/HGFR PDGFR Bcr-Abl c-Fms Ephrin receptor FLT3 BTK Itk Anaplastic lymphoma kinase (AL Ack1 RET c-Kit FGFR EGFR Insulin Receptor Discoidin Domain Receptor BRK BMX Kinase SHP2 DYRK Tie Pyk2 GDNF Receptor

Epigenetics Histone

Methyltransferase

Anti-infection

HSV Flavivirus others Fungal Parasite HBV Bacterial Dengue virus HIV Filovirus Antibiotic VSV SARS-CoV Beta-lactamase HCV CMV Reverse Transcriptase Influenza Virus Arenavirus HIV Protease

MAPK/ERK Pathway

ERK p38 MAPK MEK MAP3K Ribosomal S6 Kinase (RSK) Raf JNK MAP4K KLF Mixed Lineage Kinase MNK

Vitamin D Related/Nuclear Rece

Estrogen Receptor/ERR Progesterone Receptor VD/VDR Androgen Receptor Thyroid Hormone Receptor Nuclear Hormone Receptor 4A/NR Constitutive Androstane Recept

Cytoskeleton

MARCKS Integrin Gap Junction Protein Myosin Polo-like Kinase (PLK) Annexin A Dynamin Arp2/3 Complex

Antibodydrug Conjugate/ADC Rel

ADC Cytotoxin Antibody-Drug Conjugates (ADCs Drug-Linker Conjugates for ADC

PROTAC

Molecular Glues PROTACs Ligands for Target Protein for PROTAC Linkers Ligands for E3 Ligase E3 Ligase Ligand-Linker Conjug PROTAC-Linker Conjugates for P Target Protein Ligand-Linker C SNIPERs LYTACs AUTOTACs

通用试剂类

氨基酸

氨基酸犬尿氨酸系列

胆酸系列

蛋白及衍生物

合成多肽

核酸及其衍生物

抗生素及抗病毒

抗生素及抗病毒抗真菌抗生素抗细菌抗生素抗肿瘤抗生素抗病毒化合物

酶辅酶

染色剂指示剂

生物缓冲剂

碳水化合物

碳水化合物多糖寡糖去垢剂

通用试剂

微生物检测

微生物培养基

维生素

显色及标记试剂

植物生长激素

其他生化试剂

其他生化试剂表面活性剂无机盐

还原剂

蛋白修饰

交联剂

表面活性剂/去垢剂

非离子表活剂/去垢剂阴离子表活剂/去垢剂阳离子表活剂/去垢剂

生物耗材

吸头类

常规吸头滤芯吸头（PCR用）

PCR类

离心管类

常规离心管

细胞培养类

细胞培养板细胞培养皿细胞冻存培养瓶

液体处理类

移液管

体外诊断

核心原料

亲和素

植物研究相关

植物激素

赤霉素类(GA) 细胞分裂素(CTK) 油菜素甾醇(BR) 其他植物激素脱落酸（ABA）乙烯(ETH)

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Firefly&Renilla-Light双萤光素酶报告基因检测试剂盒

总货号: MA0520

货号	规格	发货时间
MA0520-1	100T/盒 [￥900.00] :￥900.00	现货
MA0520-2	1000T/盒 [￥5500.00] :￥5500.00	现货

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产品简介

本产品是一种高灵敏度、稳定、均质的双报告基因检测试剂盒。本试剂盒中含有高纯度的萤火虫萤光素(Firefly Luciferin)和腔肠素(Coelenterazine)，萤火虫（Firefly）萤光素酶和海肾（Renilla）萤光素酶的活性可在单个样品中依次检测。先以萤光素(Luciferin)为底物检测萤火虫萤光素酶(Firefly Luciferase)，后加入淬灭萤火虫萤光素酶催化Luciferin发光的物质，同时以腔肠素(Coelenterazine)为底物来检测海肾萤光素酶(Renilla Luciferase)实现双萤光素酶报告基因检测。

将Dual-FIREFLYGLO Luciferase检测试剂混合萤光素底物后直接加入细胞，使细胞裂解，产生的光信号半衰期近乎2h。此后加入混有海肾萤光素酶底物的Stop&RENILLALIGHT Reaction Buffer检测试剂终止萤火虫萤光素酶反应的发光，检测海肾萤光素酶的光信号。海肾萤光素酶通常作为内参校正细胞数量及转染效率的差异，以通过减少外部影响来获得更可靠的实验数据。本试剂盒操作简便，灵敏度高，发光信号稳定，适合进行高通量检测。

反应原理如下：

产品优势

1、本产品操作便捷，读数稳定，检测速度快：本产品比其它双萤光素酶测定方法更加简单快捷，细胞可以在同一块多孔板中培养和检测，无需洗涤细胞，无需更换或去除培养液，也无需预先裂解和收集细胞样品，只需要加样-读板，即可完成实验。产生的光信号半衰期近乎2h，发光信号稳定。

2、使用灵活便捷，适用范围广：本产品发光信号稳定，既适用于少量样品的检测，也适用于大量样品的高通量筛选。

3、海肾萤光素酶检测工作液的淬灭效果好：海肾萤光素酶检测试剂可以抑制99.9%以上的萤火虫萤光素酶催化的发光信号，使得海肾萤光素酶活性检测结果更加准确。

4、兼容性强：本产品兼容各种常见培养液，正常培养液中的酚红、10%以内的胎牛血清或小牛血清、2%以内的DMSO或乙醇对信号和稳定性基本没有影响，常用的盐类或金属离子在正常浓度下也基本没有影响。

双萤光素酶报告基因产品对比

美仑的两款双萤光素酶报告基因检测试剂盒的主要特点和差异如下。

如果对发光信号要求很高，推荐使用双萤光素酶报告基因检测试剂盒（MA0518）；如果对发光信号和稳定性都有要求，需要批量或连续操作，推荐使用Firefly&Renilla-Light双萤光素酶报告基因检测试剂盒（MA0520）。对于常规的实验室检测，优先推荐使用Firefly&Renilla-Light双萤光素酶报告基因检测试剂盒（MA0520）。

产品货号

产品名称

发光类型

信号强度

灵敏度

半衰期

包装

批量样品检测

试剂混合后-20℃存储最佳使用时间

推荐指数

MA0518

双萤光素酶报告基因检测试剂盒

闪光型

非常高

非常灵敏

10-15分钟(Firefly)

约200秒(Renilla)

一瓶细胞裂解液；

一瓶Firefly底物溶剂；

一瓶Firefly底物粉末；

一瓶Renilla底物溶剂；

一管Renilla底物母液

不适合

一周

★★★★

MA0520

Firefly&Renilla-Light双萤光素酶报告基因检测试剂盒

辉光型

很高

灵敏

近乎2h

一瓶Firefly底物溶剂；

一瓶Firefly底物粉末；

一瓶Renilla底物溶剂；

一管Renilla底物母液

非常适合

一周

★★★★★

保存条件

未开封试剂盒-20℃保存，自生产之日起12个月有效；

溶解分装后的Dual-FIREFLYGLO Luciferase检测试剂于-80℃以下避光保存6个月，或-20℃短期保存不超过一个月。

运输条件

干冰运输。

注意事项

1. 检测仪器选择：能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测，但是针对相同的样品，不同检测器本底信号值和测量值均可能不同；且对于同一样本检测，不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰，推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。

2. 由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，所以应确保同组内不同样本检测条件一致。

3. 酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将检测试剂以及细胞培养板平衡至室温。

4. 为取得最佳淬灭以及发光结果，加入Stop&RENILLALIGHT Reaction Buffer后，需要孵育至少10min才可以检测Renilla Luciferase活性。

5. 如需同时检测多个细胞培养板，请尽量确保每个细胞板加入检测溶液后孵育时间一致，再进行数据读取，以此获得最佳的检测结果。

6. Stop&RENILLALIGHT Substrate(100×)配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于包装规格的情况，此时用无水乙醇把体积补足至包装规格，并混匀后即可使用。

7. 萤火虫萤光素酶催化的生物发光的最强波长为560nm，海肾萤光素酶催化的生物发光的最强波长为480 nm。

数据展示：

（1）Firefly与Renilla萤光素酶发光稳定性及线性检测

方法：分别将293T细胞和CHO-K1细胞表达的Firefly&Renilla萤光素酶稀释不同倍数，检测双报告基因试剂盒纯酶水平发光稳定性及线性拟合情况。

结论：

（1）产品检测稳定性良好，半衰期近乎2h。

（2）单一时刻光强-Firefly及Renilla萤光素酶浓度标曲线性良好（R²=0.999）。

图1. Firefly&Renilla萤光素酶发光稳定性及线性检测

（2）细胞内Firefly与Renilla萤光素酶发光稳定性及线性检测

方法：细胞培养体系下验证光强稳定性及细胞密度-光强标曲。将Firefly&Renilla萤光素酶载体共转染入293T细胞和CHO-K1细胞中，24h后分别使用产品检测细胞水平发光稳定性（10000个细胞/孔）及线性拟合情况。

结论：

（1）产品检测稳定性良好，半衰期近乎2h。

（2）单一时刻细胞内光强-Firefly及Renilla萤光素酶浓度标曲线性良好（R²=0.999）。

图2. 细胞内Firefly&Renilla萤光素酶发光稳定性及线性检测

（3）本公司产品与竞品发光强度对比情况

方法：将CHO-K1细胞表达的Firefly及Renilla萤光素酶，分别用竞品及本公司同系列产品检测，并比较发光强度情况。

结论：本产品Firefly及Renilla发光强度稍高于竞品，孵育10min检测Firefly/Renilla比值与竞品相近。

图3. 本公司产品与竞品发光强度对比情况

	MA0520	竞品V	竞品P
Firefly/Renilla	3.83	3.69	3.55

（4）本公司产品与竞品发光稳定性对比情况

方法：将Firefly&Renilla萤光素酶载体共转染入CHO-K1细胞，24h后分别用本试剂盒及竞品检测，并比较发光稳定性情况。

结论：本产品Firefly及Renilla发光强度稍高于竞品，发光稳定性与竞品相近。

图4. CHO-K1细胞内MA0520及竞品Firefly&Renilla萤光素酶发光稳定性对比情况

（5）在哺乳动物细胞多种培养基中检测Firefly及Renilla萤光素酶发光信号

方法：将Firefly及Renilla萤光素酶稀释在多种培养基中，与Firefly Luciferase检测工作液及Renilla Luciferase检测工作液1：1混合后，检测发光信号。用DMEM培养基进行数据归一化。

结论：本双报告基因体系兼容多种培养基。

图5. 本产品在不同培养基中发光检测情况

（6）Firefly&Renilla发光淬灭效果

方法：相同浓度的Firefly、Renilla萤光素酶的体系中，依次加入本产品及竞品的Firefly和Renilla反应液，分别记录两者萤光素酶的发光强度以及淬灭情况。

结论：本产品的双酶发光强度稍高于竞品，淬灭效果显著强于竞品。

图6. 发光淬灭效果检测情况

我司所售出产品仅供于科研研究用途（非临床科研研究），每次销售产品行为都适用于我司网上所列明的通用销售条款

英文名字：Firefly&Renilla-Light Luciferase Reporter Assay Kit

质量标准：Meilunbio

摩尔浓度计算器（本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系）

摩尔浓度计算公式：质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)

质量（g）

浓度 (mol/L)

体积 (L)

分子量 (g/mol)

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