大连美仑生物技术有限公司

Apoptosis Bcl-2 Bcl-6 Caspase Ferroptosis Mdm2 p53 RIP kinase Survivin TNF-alpha Cuproptosis IAP Metabolic Enzyme/Protease PDHK ROS Kinase Phosphatase MDM-2/p53 Kinesin PKC

Autophagy

Autophagy LRRK2 Estrogen/progestogen PINK1/Parkin Dynamin Anti-infection Oxidative Phosphorylation Akt AMPK JAK Toll-like Receptor (TLR)

Epigenetics

DNA Methyltransferase DNMT Epigenetic Reader Domain Histone Acetyltransferase Histone demethylases Histone Methyltransferase PKC AMPK HDAC JAK

GPCR/G Protein

Adenosine Receptor Angiotensin Receptor Cannabinoid Receptor CaSR E1 Activating CRFR E2 conjugating E3 Ligase Endothelin Receptor GHSR Glucagon Receptor GLP-1R GPCR19(TGR5) GPR GPR119 GPR40(FFAR1) Imidazoline Receptor Leukotriene Receptor LPA Receptor OX Receptor Protease-activated Receptor Rac Prostaglandin Receptor Oxytocin Receptor Ras Rho S1P Receptor Sigma Receptor 5-HT Receptor Neurokinin Receptor mAChR

Immunology/Inflammation

AhR CCR COX Complement 5(C5) CXCR Histamine Receptor IL Receptor Immunology IL-5 NOD1 IL-12 PD-1 IL-17 PDL-1 reactive oxygen species (ROS) NLRP3 TLR

Integrin

JAK-STAT/IL6

JAK STAT IL-6 Pim

MAPK

ErbB2 ERK JNK MEK p38 MAPK Mixed Lineage Kinase Raf

Membrane Transporter/Ion Chann

Amino acid transporter antagon ATPase Calcium Channel CFTR Chloride channel CRM1 GABA Receptor GluR iGluR NMDAR P-gp Potassium Channel Proton Pump SGLT Sodium Channel TRPV P-glycoprotein Na+/K+ ATPase Piezo Channel

Metabolic Enzyme/Protease

5-alpha Reductase Aminopeptidase ATP-citrate lyase in Carbonic Anhydrase CETP DGAT DPP-4 Factor Xa FOX FXR Glucokinase(GK) GSNOR HCV Protease HIF HMG-CoA Reductase HSP IDO Lactate Dehydrogenase Integrase MMP NAMPT P450 PAI-1 PDE PGC-1α Phospholipase Procollagen C Protein Proteases PKM Proteasome RAR/RXR Retinoid Receptor Serine Protease Thrombin Transferase Xanthine Oxidase p38-MAPK Stearoyl-CoA Desaturase (SCD) Mitochondrial Metabolism (MPC) Tyrosinase Endogenous Metabolite

Neuronal Signaling

5-HT Receptor AChR BACE Beta Amyloid Beta-secretase CaMK CGRP Receptor Dopamine Receptor FAAH Gamma-secretase GlyT iGluR MAO mAChR Opioid Receptor Serotonin Transporter

NF-κB

NF-κB Nrf2 IκB/IKK Reactive Oxygen Species

Others

Androgen Receptor Aromatase CD20 CD52 c-Myc CPT1 c-RET CTLA-4 Decarboxylase Dehydrogenase FPR GLUT Glutaminase HIV ProteaseAnti-infection HSP90 Hydroxylase IAP IgE IRE1 LDL Lipase Lipoxygenase Lysyl Hydroxylase MT Receptor NADPH oxidase others P2 Receptor PAFR PCSK9 RAAS RANK Ligand Reverse Transcriptase S6 Kinase Thioredoxin Tie-2 SARM Vasopressin Receptor VDA Vitamin D Related CDA TrxR PDE IDO

PI3K/Akt/mTOR

Akt MELK mTOR GSK-3 PDK-1 PI3K PIKfyve PTEN RSK

Protein Tyrosine Kinase/PTK

ACK ALK Axl Bcr-Abl BTK cAMP(PKA) c-Kit c-Met CSF-1R DYRK EGFR Ephrin receptor FAK FGFR FLT3 HER2 IGF-1R MET Insulin Receptor PDGFR PKA ROS Src Syk Trk receptor VEGFR

Stem Cell /Wnt

c-Jun Hedgehog/Smoothened Hippo pathway Met stemness kinase OCT Wnt/β-catenin

Cell Cycle/DNA Damage

Antifolate APC ATM/ATR Aurora Kinase BMI-1 Casein Kinase CDK CD38 Chk DHFR DNA alkylator DNA-PK DNA/RNA Synthesis DUB Dynamin HDAC HSP Kinesin Microtubule Associated p97 MTH1 PAK PERK PLK PPAR PARP ROCK Sirtuin RAD51 Telomerase TOPK Topoisomerase Wee1 Deubiquitinase

Metabolic Enzyme/Protease

Hexokinase

Protein Tyrosine Kinase/RTK

TAM Receptor ROS Kinase

Epigenetics Histone

Methyltransferase

Stem Cell/Wnt

Adenylate Cyclase YAP

Anti-infection

HSV

MAPK/ERK Pathway

ERK

Vitamin D Related/Nuclear Rece

Estrogen Receptor/ERR

通用试剂类

氨基酸

氨基酸犬尿氨酸系列

胆酸系列

蛋白及衍生物

合成多肽

核酸及其衍生物

抗生素及抗病毒

抗生素及抗病毒抗真菌抗生素抗细菌抗生素抗肿瘤抗生素抗病毒化合物

酶辅酶

染色剂指示剂

生物缓冲剂

碳水化合物

碳水化合物多糖寡糖去垢剂

通用试剂

微生物检测

微生物培养基

维生素

显色及标记试剂

植物生长激素

其他生化试剂

其他生化试剂表面活性剂无机盐

还原剂

蛋白修饰

交联剂

生物耗材

吸头类

常规吸头滤芯吸头（PCR用）

PCR类

离心管类

常规离心管

细胞培养类

细胞培养板细胞培养皿细胞冻存培养瓶

体外诊断

核心原料

亲和素

植物研究相关

植物激素

赤霉素类(GA) 细胞分裂素(CTK) 油菜素甾醇(BR) 其他植物激素脱落酸（ABA）乙烯(ETH)

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Firefly-Glo萤光素酶报告基因检测试剂盒

总货号: MA0519

货号	规格	发货时间
MA0519-1	100T/盒 [￥600.00] :￥600.00	现货
MA0519-2	1000T/盒 [￥3500.00] :￥3500.00	现货
MA0519-3	5000T*2/盒 [￥21000.00] :￥21000.00	现货

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产品组成	100T	1000T	10000T
FIREFLYGLO Luciferase Reaction Buffer	10ml	100ml	500ml(5000T)*2
FIREFLYGLO Luciferase Substrate	1 vial	1 vial	1 vial(5000T)*2
说明书	1份	1份	1份

产品简介：
FIREFLYGLO萤光素酶报告基因检测系统是一种辉光型定量检测试剂盒，具有高灵敏度和发光信号稳定的特点，可以满足高通量检测萤光素酶在哺乳动物细胞中的表达。相对于美仑闪光型Firefly Luciferase Reporter Assay Kit（MA0517），本品FIREFLYGLO Luciferase Reporter Assay Kit（MA0519）具有以下优点：采用了一种全新的萤光素酶检测底物，提高了发光信号的稳定性，近乎2小时的信号半衰期为实验设计提供了更大的灵活性；采用加样-混匀-检测的操作方法，无需依赖自动进样器，并且无需弃培养液、离心等步骤，简化了实验流程；本试剂盒组分做了大量优化，与传统闪光型产品相比，无明显刺激性气味。FIREFLYGLO萤光素酶报告基因检测试剂盒可用于多种常用细胞培养液：RPMI 1640、DMEM 、MEM-α、F12、DMEM/F12等，其半衰期均为2小时左右（22℃），满足绝大多数高通量实验需求。

使用说明：

1.自备材料
PBS；多道排枪；白色不透光细胞培养板；化学发光仪或酶标仪。
2.检测前准备
1）首次使用时将FIREFLYGLO Luciferase Reaction Buffer一次性全部倒入FIREFLYGLO Luciferase Substrate瓶中，充分混匀后，按使用需求进行分装，建议-70℃长期保存或者短期存放于-20℃不超过一个月，并尽快使用。
2）每次实验前将分装后冻存的检测试剂平衡至室温。
3.操作方法
1）从细胞培养箱中取出细胞培养板，放置5-15min，恢复至室温。
注：使用白色不透光的细胞培养板，减少孔间的信号干扰。
2）加入检测溶液
使用多道排枪向每个细胞孔中加入平衡至室温的含有底物的FIREFLYGLO Luciferase Reaction Buffer，加样体积与细胞培养液体积相同。例如，96孔板通常加入80-100ul培养液，相应加入80ul-100ul检测溶液；384孔板通常加入20-30ul培养液，相应加入20-30ul检测溶液。
3）振荡混匀
为了使得细胞裂解充分，建议将细胞培养板放在振荡混匀仪或附带振板功能的仪器上，室温条件下，采用中高速振板5-10min。
注：建议振板混匀时间为5-10min，可根据细胞量进行适当调整，确保细胞充分裂解，得到稳定的发光检测结果。
4）检测
振板混匀后于化学发光仪或酶标仪中检测Firefly Luciferase报告基因活性。
注：为得到最佳检测结果，请在加入检测试剂后2小时内完成检测。

注意事项：
1、检测仪器选择：能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测，但是针对相同的样品，不同检测器本底信号值和测量值均可能不同；且对于同一样本检测，不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰，推荐使用不透明白色细胞培养板。
2、由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，所以应确保同组内不同样本检测条件一致。
3、酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将检测试剂以及细胞培养板平衡至室温。
4、为保证萤光素酶检测试剂稳定性，适量分装后建议-70℃长期避光保存或者短期存放于-20℃不超过一个月，并尽快使用，尽量避免多次反复冻融。
5、如需同时检测多个细胞培养板，请尽量确保每个细胞板加入检测溶液后孵育时间一致，再进行数据读取，以此获得最佳的检测结果。

保存条件：

全新试剂盒-20℃保存，一年有效；
溶解分装后的FIREFLYGLO Luciferase Substrate于-70℃避光保存一年，或-20℃短期保存不超过一个月。

运输条件：-10℃干冰运输。

数据展示

图1. FIREFLYGLO发光体系在光强、稳定性以及线性效果对比P进口品牌。(A) 萤光素酶浓度-光强-时间标曲三维图。在一定浓度范围内，标准曲线统计显示为一个截面，说明meilunbio的FIREFLYGLO发光体系在2h以内任一时刻的线性良好。(B) meilunbio的FIREFLYGLO萤光素酶报告基因检测试剂盒对比P 进口公司最新版本，在绝对光强和稳定性方面非常接近。(C) 单一时刻光强-Firefly萤光素酶浓度标曲线性良好（R2=0.9994）。

图2. FIREFLYGLO发光体系在不同培养基发光及半衰期验证。美仑FIREFLYGLO发光体系在常用培养基如：DMEM、RPMI1640、DMEM/F12、MEMα、F12等都可以正常发光；萤光半衰期在100-120min 左右，与P进口品牌官方公布的数据相当（此处未完全展示，可参考P公司官方网页）。

图3. 酚红浓度-FIREFLYGLO萤光稳定性验证。配制含有浓度梯度的PBS溶液，各自加入等量的萤火虫萤光素酶并验证FIREFLYGLO 的发光稳定性。由图可知，meilunbio® FIREFLYGLO 对比P进口品牌具有更好的酚红耐受能力。

图4. (A)细胞浓度梯度光强稳定性和(B)细胞浓度-光强标曲示例。在细胞培养基环境中，原位追踪检测Firefly Luciferase发光情况。由图可知，萤光稳定性和绝对光强与P进口品牌差异不大；而且，单一时刻光强-细胞数标曲线性良好（R2=0.9993）。

图5. 293T细胞中TNFα 浓度梯度诱导NF-κB通路检测效果美仑对比P进口品牌。(A) 归一化处理后，由图可知TNFα浓度梯度在2h以内各个时刻均保持着相对一致的诱导关系；并且随着时间进行，这种诱导关系并无明显变化。(B) 单一时刻TNFα 浓度梯度诱导NF-κB通路效果美仑对比P进口品牌，结果无显著性差异。

我司所售出产品仅供于科研研究用途（非临床科研研究），每次销售产品行为都适用于我司网上所列明的通用销售条款。

英文名字：Firefly-Glo Luciferase Reporter Assay Kit

质量标准：Meilunbio