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快速动物组织总RNA提取试剂盒(双离心柱型)
总货号: MA2008
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产品简介

快速动物组织总RNA提取试剂盒Animal Tissue Total RNA Extraction Kit是基于硅胶柱纯化技术的双离心柱式RNA提取试剂盒。试剂盒采用膜过滤技术,可更大程度的去除基因组DNA,高效专一的得到总RNA。

本产品适用于20 mg动物软组织(肝脏、脾脏、肾脏、脑等)中快速提取总RNA。整个提取流程可在30分钟内完成,无需使用DTTβ-巯基乙醇提取的总RNA纯度高、完整性好,最大程度减少DNA、蛋白杂质污染,可直接用于RT-PCRqRT-PCRNorthern Blot、芯片分析、Dot BlotPoly A筛选、体外翻译RNA酶保护分析及分子克隆等实验。

产品优势

● 省时高效:30min内即可完成多个样品的总RNA提取;
● 安全低毒:无需使用DTT、β-巯基乙醇等具有毒性的试剂,操作安全性更高;
● 基因组DNA去除高效:采用独特的基因组DNA过滤柱,无需DNase处理,可高效去除基因组DNA;
● RNA纯度高:提取所得的RNA无杂质残留,能够适配对RNA纯度和完整性有严苛要求的下游实验。

数据展示

● 动物组织提取总RNA效果

方法:分别使用美仑快速动物组织总RNA提取试剂盒(双离心柱型)及同类竞品Product A,同时提取小鼠肝脏和小鼠肾脏总RNA,进行琼脂糖凝胶电泳验证

结果:如图1 所示,MA2008提取的动物组织RNA质量高、完整性好。


1. 快速动物组织总RNA提取试剂盒提取的动物组织RNA电泳图

保存条件

Proteinase K置于-20℃保存,其余组分常温保存。自生产之日起12个月有效。

运输条件

湿冰运输

注意事项

1. 使用前请一定按照使用说明2的要求配制相关溶液。

2. RNABuffer FRL中时不会被RNase降解但提取后继续处理过程中如果需要用到塑料和玻璃器皿则应使用RNase-Free的。玻璃器皿可在150℃烘烤4h,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10 min,然后用RNase-Free水彻底清洗,再灭菌。更建议使用一次性的RNase-free实验器具,并且RNA实验专用,不要用于其它实验,避免交叉污染。

3. 为了预防RNase污染,请经常更换新手套,以防止来自皮肤表面的RNase污染物。

4. 提取RNA过程建议在专门做RNA的超净台中进行,如有必要请提前喷洒核酸酶清除试剂。

5. 为了您的安全和健康,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。

常见问题与解答

问题

可能原因

建议

RNA得率低

样品裂解不充分

建议参考说明书充分研磨、振荡样品,使样品充分裂解

样品用量过多

建议按照说明书要求适量取样

洗脱不充分

RNase-Free ddH2O需直接加到膜中央,并静置2min 后再离心,必要时可进行二次洗脱以提高产量

吸附柱有乙醇残留

使用Buffer FRW1漂洗后需要开盖晾干吸附柱中的乙醇

RNA降解

样品处理或保存不当

尽量使用新鲜样品或者解冻次数不超过次的样品

样品过量,影响裂解液的裂解能力,造成RNase未被充分抑制,导致RNA降解

请参考使用说明推荐取样量,若要增加样品起始量,则后续实验中各溶液量均要等比例增加。对于内源RNase含量较多的组织应减少样品量,适当增加裂解液用量

电泳过程中发生降解

使用RNase-FreeLoading Buffer、琼脂糖和缓冲液等

环境、试剂或耗材中含有RNase

使用RNase-free的试剂及耗材,建议在超净台中操作

DNA污染

样品裂解时加入的试剂量过少

请参考使用说明推荐试剂量

去除基因组DNA的操作不够

DNA含量较多,可延长DNase I消化时间或重复消化

次生代谢物较多

次生代谢物含量高的样本在提取RNA时易出现基因组的污染

过滤柱堵塞

样品用量过多

裂解液粘稠,减少样品量或加大裂解液用量,样品量过多反而会降低产量和纯度

裂解离心不充分

组织裂解液需高速离心去除杂质,杂质会引起柱子的堵塞,转移上清液尽量不要吸到杂质。如gDNA过滤柱发生堵塞,可增加离心次数、时间或转数;或者可将滤液吸出加入适量裂解液匀浆后再转移至新的gDNA过滤柱中

离心温度过低

本产品使用操作均在室温下进行

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英文名字Animal Tissue Total RNA Extraction Kit

质量标准:meilunbio
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摩尔浓度计算公式:质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
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