| 货号 | 规格 | 发货时间 |
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10ML/盒 [¥150.00]
:¥150.00
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现货
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100ML/盒 [¥400.00]
:¥400.00
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现货
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500ML/盒 [¥1300.00]
:¥1300.00
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现货
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产品描述:
本试剂盒是一款以鲁米诺(Luminol)作为化学发光底物的低飞克极超敏的ECL化学发光试剂盒。其工作原理是:以辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体直接或间接结合膜上的目的蛋白,在洗膜后加入ECL工作液,在其碱性环境下,鲁米诺由HRP催化发光,然后通过X胶片或者化学发光成像系统来检测结果。
本试剂盒使用了优化的增强剂和氧化剂,提高了试剂盒的稳定性和检测灵敏度,对抗原的最低检测限可达到低飞克级。在Western Blot实验中,一抗(1mg/mL)储存液可稀释1:5,000至1:100,000倍,二抗(1mg/mL)储存液可稀释1:100,000至1:500,000倍,发光信号强且较持久。Meilunbio®低飞克极超敏ECL发光液特别适用于丰度较低或痕量目的蛋白的检测,对于常规的WB或者丰度较高的蛋白检测,可选择使用Meilunbio®飞克特超敏ECL发光液(美仑货号:MA0186)。
产品优势:
1. 灵敏度极高:可检测低飞克级抗原。
2. 信噪比高:样品发光信号强,条带清晰且背景值低。
3. 发光稳定性好:可重复曝光。
4. 工作液稳定性好:4℃条件下,6h内工作液与现配的一致。
5. 降低成本:可使用更高的抗体稀释倍数,大大节省抗体。
实验数据:
操作方法:详见说明书
注意事项:
1. 本ECL试剂盒灵敏度高,需要优化好样品上样量、凝胶类型、转膜方法、膜类型、封闭试剂、一抗/二抗浓度及相应孵育时间等,并按照蛋白表达丰度,参考推荐的抗体稀释比例,来获得最佳实验结果。
2. 如果印迹膜上条带过亮时,建议使用我公司生产的膜再生液(MA0181)去除抗体后重新封闭孵育,并提高一抗二抗稀释比例。如果条带过暗也可将二抗稀释比例降低至1:5000至1:10,000倍,以达到最佳效果。
3. 本试剂盒A液和B液不可以相互污染,否则会降低产品的使用效果。
4. 各组分使用后,请拧紧瓶盖,以防污染。
5. ECL工作液孵育时间不宜过长,延长孵育时间不会增加灵敏度,有时还会导致曝光条带异常。
6. 若想节约试剂,可适当将膜剪小,但请勿稀释发光液,因为发光过程的本质是酶促反应,使用过少的底物不利反应进行,也会导致膜上条带曝光不均和灵敏度明显降低。
7. 发光强度会随时间缓慢减弱,建议在曝光后两小时内完成实验。
8. 孵育二抗后,洗膜缓冲液应避免使用叠氮钠,因为叠氮钠是HPR的抑制剂。
9. 某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会造成淬灭荧光,请选择高质量保鲜膜。
10. 为了您的安全和健康,请穿戴实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
2-8℃避光保存,自生产之日起12个月有效。
运输条件:
湿冰运输(按季节)
常见问题解决方案:
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遇到的问题 |
原因分析 |
推荐解决方法 |
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胶片出现反影 |
反应系统中HRP量过多 |
稀释HRP标记物 |
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膜上出现棕色或 黄色条带 |
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暗室中观察到强烈发光 |
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条带有空斑 |
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发光信号持续时间短 |
保鲜膜、显影液或定影液污染 |
使用优质试剂耗材,规范操作,避免污染 |
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反应系统中HRP量过少 |
增加HRP标记物 |
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胶片无条带显现或者信号较弱 |
蛋白质表达量低或降解 |
适当增加上样量或提高抗体的使用浓度 |
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转膜的效率低 |
适当增加转膜时间或提高转膜效率,用预染Marker判断 |
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膜的选择不合适 |
小蛋白更适合于PVDF膜 |
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抗原、抗体量少或不匹配 |
增加抗原/抗体量或选择合适抗原/抗体 |
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X光胶片有问题 |
曝光后X光谱全黑(而非透明色),则表明胶片已完全曝光,使用新的X光片 |
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显影/定影液有问题 |
可预先曝光一张胶片进行判断,如有问题当换用新的显影/定影液 |
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曝光时间过短 |
适当的延长曝光时间 |
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高背景 |
反应系统中HRP量过多 |
稀释HRP标记物,延长封闭时间 |
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抗体未清洗干净 |
增加洗膜次数 |
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封闭不完全 |
优化封闭条件 |
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使用错误的封闭剂 |
使用其他的封闭剂 |
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过度曝光 |
降低曝光时间 |
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非特异性条带 |
一抗用量过多或者特异性较差 |
减少一抗稀释比例或者更换一抗 |
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SDS引起蛋白非特异性结合 |
实验流程中避免使用SDS |
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条带弥散或形状怪异 |
制胶问题 |
配胶时要保证充分混匀,均匀凝胶,并用针头将胶孔拨正吹出孔内的气泡 |
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上样量大 |
上样时需保证样品量一致且适当,并且含较低的盐离子浓度 |
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电泳时电压、电流过高导致电泳液过热 |
建议使用合适的电泳条件并保持低温 |
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ECL发光液失效 |
过了保质期 |
建议更换新的ECL发光液 |
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未避光保存 |
发光液中鲁米诺等成分需避光保存,否则容易失活 |
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AB液交叉污染 |
规范实验操作,吸取不同的液体需更换枪头 |
我司所售出产品仅供于科研研究用途(非临床科研研究),每次销售产品行为都适用于我司网上所列明的通用销售条款。
质量标准:MA0187-1:Meilunbio,极超敏低飞克级,A液5MLB液5ML
MA0187-2:Meilunbio,极超敏低飞克级,A液50MLB液50ML
MA0187-3:Meilunbio,极超敏低飞克级,A液250MLB液250ML