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细胞增殖及毒性检测试剂盒(CCK-8)
总货号: MA0218
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产品问答
CCK-8两个波长都要测吗? 需要怎样计算?
只测450nm下的OD值,细胞存活率 = [(As - Ab)/(Ac - Ab)] ×100% 抑制率 = [(Ac - As)/(Ac - Ab)] ×100% As:实验孔(含有细胞的培养基、CCK-8、待测药物)的吸光度 Ac:对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8、没有待测药物)的吸光度 Ab:空白孔(不含细胞和待测药物的培养基、CCK-8)的吸光度
每次测定的数值不一样,是什么原因?如何解决?
可能会有以下几个原因: 1)当在培养箱内培养时,培养板最外一圈的孔最容易干燥挥发,由于体积不准确而增加误差。一般情况下,最外一圈的孔只加培养基,不作为测定孔用。 2)有可能会因为CCK-8沾在壁上而产生误差,建议在加入CCK-8后,轻轻敲击培养板以帮助混匀。 3)每孔的细胞数量过多或过少。请预先在1,000~100,000个/孔范围内摸索条件。 4) 重复试验请保证孵育时间、接种细胞数相同。
CCK-8会导致细胞死亡吗?
CCK-8本身对细胞毒性特别小,作用时间长不会导致细胞都死亡,但是细胞长满了,本身代谢会引起细胞死亡
CCK-8除了用酶标仪还可以用什么仪器?紫外分光光度计行么?
一般cck都是用酶标仪,紫外分光光度计最好不用,因为紫外我没记错一次只能测一个孔吧,而且还得把孔内液体吸出来到紫外用的皿里,而且检测时间很长,CCK-8对孵育时间敏感,这样误差太大了
OD值偏高?
可以确认下培养时间,一般肉眼可见颜色变化即可检测
做CCK-8经常有气泡,对吸光度有影响,有什么办法去除么?
有气泡,没办法去除,但是可以避免有气泡,加药什么的枪头抵着孔壁,慢点加液体,基本不会产生气泡
细胞能一边培养一边检测?
培养一段时间测CCK-8,然后换液后可以接着养。
反映时间怎么确定?数值必须是1么?
0.1-2.5都可以,最佳是1.0左右
如何设定空白对照
在不含细胞的培养基中加入CCK-8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验(细胞毒性实验)时,还应考虑药物的吸收,可在不含细胞,加入药物的培养基中加入CCK-8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。
铺板细胞量有什么要求吗?
96孔板细胞计数的时候一般是10的4次方,我们铺96孔板,细胞浓度是5*10的4次方,取100ul铺板;可以您自己对细胞计数,保证每孔细胞数量一致。或者可以计数,方法:按不同细胞数铺板,贴壁后加CCK-8,孵育1小时,然后检测,OD值在1.5左右是最佳铺板数
哪些物质会影响CCK-8的测定?
当有氧化还原性物质存在时会影响CCK-8的测定,因此当所加药物为氧化还原性物质时需要换液再进行检测。
CCK-8对于不同的细胞,灵敏度是否一样?
不一样,悬浮细胞与贴壁细胞相比较难显色。对于贴壁细胞,一般加入CCK-8培养0.5-4小时吸光度已经很高,但对于悬浮细胞则可能吸光度较低,可以通过延长CCK-8的加入时间或增加细胞数量来解决。
产品简介
产品参数
质检证书
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摩尔浓度计算器
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Cell Counting Kit-8(简称CCK-8),是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。 

CCK-8试剂中含有WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐)是一种类似于MTT的化合物,它在电子耦合试剂1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)存在条件下,可以被线粒体内的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物Formazan (参考图1),生成的Formazan数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析,细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。

WST-8与以往的增殖/毒性测定试剂相比,具有明显优点(参考表1)。美仑CCK-8试剂盒具有灵敏度高、反应时间短、线性范围宽、数据可靠、重现性好等特点,可以广泛应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。


1. 增殖/毒性测定试剂的比较

检测方法

MTT法

XTT法

WST-1法

CCK-8法

甲瓒产物的水溶性

差(需加有机溶剂溶解)

检测灵敏度

很高

很高

最高

检测时间

较长

较短

较短

最短

检测波长

560-600nm

420-480nm

420-480nm

430-490nm

细胞毒性

高,细胞形态完全消失

很低,细胞形态不变

很低,细胞形态不变

很低,细胞形态不变

试剂稳定性

一般

较差

一般

很好

批量样品检测

可以

非常适合

非常适合

非常适合

便捷程度

一般

便捷

便捷

非常便捷


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英文名字:Cell Counting Kit-8
质量标准:Meilunbio
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摩尔浓度计算器 (本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系)
摩尔浓度计算公式:质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
质量(g
=
浓度 (mol/L)
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分子量 (g/mol)
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