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Meilunbio®飞克特超敏ECL发光液
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产品描述
本试剂盒应用于免疫印迹实验,以化学发光法检测蛋白质。其原理是以辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体直接或间接结合膜上的目的蛋白质,在洗膜后加入本试剂盒配制的ECL工作液,即可由HRP催化发出荧光。
本产品对抗原的最低检测限可达到中飞克级,在western blot实验中,一抗(1 mg/mL)储存液可稀释1:1,000至1:50,000倍,二抗(1mg/mL)储存液可稀释1:50,000至1:200,000倍。发光信号持久,结果可以通过X光胶片曝光或者其他适当荧光成像设备进行检测。
产品优势
1. 灵敏度高,可检测中飞克级抗原。
2. 信噪比高,条带清晰。
3. 抗猝灭能力强,可重复曝光。

4. 节省抗体,降低成本。

操作指南

1. 进行常规Western Blot实验,可参考美仑官网技术分享:http://www.meilune.com/article.php?id=120。

2. 按照1:1的比例等体积混合适量A液和B液制备ECL工作液。
注:ECL工作液最好在临近使用前配制,推荐使用剂量:0.1ml工作液/cm2膜。
3. 用镊子取出洗好的膜,沥干膜上洗膜液,将结合有蛋白的一面朝上,放置于洁净保鲜膜上。
4. 加上配好的ECL工作液,孵育时确保工作液覆盖整张膜,室温孵育1-2min。
5. 弃去印迹膜上ECL工作液,将一张洁净的保鲜膜平整的铺在印迹膜上。
6. 将处理好的印迹膜置于X光片盒中,在暗室中取一张胶片小心置于膜上,曝光时间取决于膜上的发光强度,曝光后立即显影定影,或将印迹膜放置到荧光成像仪内,按仪器说明书进行检测。
实验数据

 

(上样蛋白量倍比稀释,目的蛋白Histone H3)
图1. 我司ECL发光试剂与其他品牌同级别产品检测灵敏度的比较

图2. 我司ECL发光试剂信号持续时间的研究
 
注意事项

1. 本ECL试剂盒灵敏度高,需要优化好上样量、一抗、二抗浓度和稀释液、印迹膜及封闭试剂,并按照蛋白表达丰度,参考推荐的抗体稀释比例,来获得最佳实验结果。

2.如果印迹膜上条带过亮时,建议使用我公司生产的膜再生液(MA0181)去除抗体后重新封闭孵育,并提高一抗二抗稀释比例。如果条带过暗也可将二抗稀释比例降低至1:5000至10,000倍,以达到最佳效果。
3. 本试剂盒A液和B液不可以相互污染,否则会降低产品的使用效果。
4. 发光强度会随时间缓慢减弱,建议在两小时内完成实验。
5. 孵育二抗后,洗膜缓冲液应避免使用NaN3,这是HPR的抑制剂。
6. 为了您的安全和健康,请穿戴实验服并戴一次性手套操作。
保存条件
2-8℃避光保存,1年有效。
备注:所有报价均已含国内快递费及发票费用。库存情况可能有所变动,请与我们销售人员确认为准,价格情况请直接联系我们销售人员。

 我司所售出产品仅供于科研研究用途(非临床科研研究),每次销售产品行为都适用于我司网上所列明的通用销售条款。

英文名字:Meilunbio® fg super sensitive ECL luminescence reagent
质量标准:Meilunbio,特超敏飞克级,A液50MLB液50ML
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摩尔浓度计算器 (本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系)
摩尔浓度计算公式:质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
质量(g
=
浓度 (mol/L)
x
体积 (L)
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分子量 (g/mol)
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