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DBeQ
总货号: MB3668
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25MG [¥1390.00] :¥1390.00
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DBeQ  
分子式:C22H20N4   分子量:340.42

简介: DBeQ 是一种有效的,选择性的,ATP 竞争性的 p97 抑制剂,对 p97(wt) 和 p97(C522A) 的 IC50 值分别为 1.5 μM 和 1.6 μM,同时可抑制 Vps4,IC50 值为 11.5 μM。
别名:JRF 12, N2,N4-dibenzylquinazoline-2,4-diamine
物理性状及指标:
外观:………………白色至类白色粉末
溶解性:……………DMSO:68 mg/mL (199.75 mM);Water Insoluble;Ethanol:5 mg/mL (14.68 mM)
含量:………………>98%

储存条件: -20℃,避光防潮密闭干燥
生物活性

产品描述

DBeQ是选择性的,有效的,可逆的,ATP竞争性的p97 抑制剂,IC50 为 1.5 μM。

靶点

p97

IC50

1.5 μM

体外研究

DBeQ作用于HeLa细胞,抑制UbG76V-GFP, ODD-Luc和Luc-ODC 降解,IC50分别为2.6 μM, 56 μM 和45 μM。DBeQ作用于N-ethylmaleimide-敏感因子(NSF)和26S蛋白酶,效果至少低50倍。DBeQ与ATP竞争性抑制P97,Ki为3.2 μM,说明DBeQ结合到D2域的活性位点。DBeQ (10 μM) 作用于HEK293细胞,有效抑制TCRα-GFP降解。DBeQ作用于HEK293细胞,3小时内诱导CHOP,但不增加p21水平,这种作用存在浓度依赖性。DBeQ (15 μM) 作用于Hela细胞,诱导LC3-II 在在细胞核及浓缩膜和胞质级组分中大量积累。DBeQ作用于HeLa细胞,通过抑制LC3-II自噬降解,而不是诱导自噬,而发挥作用。DBeQ (10 μM) 作用于HeLa细胞,快速促进caspases-3和-7激活。比激活外在caspase-8通路,DBeQ更有效激活内在caspase-9凋亡途径,而STS激活两种途径程度相似。DBeQ作用于 多发性骨髓瘤细胞(RPMI8226)比作用于正常人胚肺成纤维细胞(MRC5)效果强5倍,HeLa细胞和Hek293细胞具有中等的敏感性。在ERAD和自噬途径内,DBeQ干扰底物降解。DBeQ (12 μM) 作用于HeLa细胞中。抑制细胞中和,这种作用存在剂量依赖性。DBeQ(10 μM)完全抑制病毒和抗体的降解,但不抑制IgG Fc的降解。DBeQ作用于U20S细胞,降低基本的和营养刺激的MTOR靶点磷酸化,与Rapamycin 效果类似。

特征

DBeQ快速有效地诱导caspase激活和细胞死亡。

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MNS (3,4-Methylenedioxy-β-nitrostyrene, MDBN)

用途及描述 :科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面,严禁用于人体。DBeQ是一种有效的ATPase p97特异性抑制剂,是泛素融合降解(UFD)通路的重要组成部分。DBeQ抑制泛素化蛋白降解、内质网相关降解途径和自噬体成熟。该化合物还能有效抑制细胞增殖,诱导caspase 3/7活性和凋亡。本品可用于相关领域的科研实验。
储液配置

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.9375 mL

14.6877 mL

29.3755 mL

5 mM

0.5875 mL

2.9375 mL

5.8751 mL

10 mM

0.2938 mL

1.4688 mL

2.9375 mL

50 mM

0.0588 mL

0.2938 mL

0.5875 mL

经典实验操作(仅供参考)

激酶实验:

手动ATP酶实验:
实验 Buffer [20 μL 2.5×浓度, 1×= 50 mM Tris (pH 7.4), 20 mM MgCl2, 1 mM EDTA, 和 0.5 mM tris(2-carboxyethyl)phosphine (TCEP)] 加到96孔板中。纯化的p97(25 μL 50 μM) 975 μL 1× 实验 Buffer中稀释,然后每孔中加入10 μL。每孔加入DBeQ (10 μL) 或 5% DMSO (10 μL) ,实验板在室温下温育10分钟。按如下进行ATP酶实验:每孔加入10 μL 500 μM ATP (pH 7.5), 在室温下温育60分钟, 然后加入50 μL Kinase Glo Plus 试剂,随后在室温下黑暗环境中温育10分钟。使用 Analyst AD读取发光值。在一个浓度范围(0, 0.048, 0.24, 1.2, 6, 和30 μM)按一式三份测定DBeQ。

细胞实验:

  • Cell lines: MRC-5, Hek293, HeLa 和 RPMI8226 细胞
  • Concentrations: 33 μM
  • Incubation Time: 48 小时
  • Method: 细胞按每孔5,000个接种于384孔白色固体板中。使用荧光素酶siRNA或p97siRNA(10 nM)进行细胞转染48小时,或在指定时间使用DBeQ处理。每孔加入Caspase-3/7 Glo, caspase-6 Glo, caspase-8 Glo, 或 caspase-9 ,按500rpm震荡混合 1分钟。在室温下温育1小时后,测定发光信号。使用CellTiter-Glo试剂测定细胞存活力。为了测定细胞活力的IC50,使用七种浓度的MG132或DBeQ(开始于μM的三倍连续稀释液)处理细胞48小时。拟合发光信号归一化DMSO处理细胞的百分比,计算IC50值。

【注意
我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。
部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。


备注:库存情况可能有所变动,请与我们销售人员确认为准,价格情况请直接联系我们销售人员。
我司所售出产品仅供于科研研究用途(非临床科研研究),每次销售产品行为都适用于我司网上所列明的通用销售条款。

CAS 号:177355-84-9
英文名字:DBeQ
质量标准:>98%,BR
分子式:C22H20N4
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