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考马斯亮蓝G250
考马斯亮蓝G250
考马斯亮蓝G250
商品货号:MB4686
CAS 号:6104-58-1
英文名字:Brilliant Blue G
质量标准:BS
分子式:C47H48N3NaO7S2
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    考马斯亮蓝G250;Brilliant Blue G
    分子式:C47H48N3NaO7S2   分子量:854.02
    简介:考马斯亮蓝G250(Coomassie brilliant blue G250),考马斯亮蓝G-250在流离状态下呈红色,最大光吸收在465nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比。是常用蛋白染色剂,可用于染色丙烯酰胺凝胶和琼脂糖凝胶中的蛋白质。考马斯亮蓝G-250由于与蛋白质的结合反应十分迅速,常用来作为蛋白质含量的测定。当考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为0~1 000μg/mL,最小可测2.5μg/mL蛋白质,是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。
    别名:考马斯亮蓝G250 ;考马斯亮兰G250,酸性蓝90,考马斯亮蓝G,亮蓝G ;Acid Blue 90 Brilliant Blue G 250 C.I. 42655 Coomassie® Brilliant Blue Gand G 250 Coomassie Blue G250
    物理性状及指标
    外观:……………………暗蓝-紫-棕色固体
    熔点:……………………>100℃
    溶解性:…………………Water:40mg/ml;Ethanol:40mg/ml;DMSO:10mg/ml;DMF:0.5 mg/ml
    最大吸收波长:…………610nm
    储存条件:常温,避光防潮密闭干燥
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    用途及描述:科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面,严禁用于人体。本品为是分析生化中SDS-PAGE和BN-PAGE中蛋白质染色剂,也是P2X7嘌呤能受体激动剂。
    使用方法推荐
    考马斯亮蓝G-250配制
    1.称取100mg考马斯亮蓝G-250。
    2.溶于50ml90%乙醇中。
    3.加入85%的磷酸10ml。
    4.最后用蒸馏水定溶到1000ml。
    (此溶液在常温下可放置一个月。)
    具体操作步骤:
    1.Bradford浓染液的配制:将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50m1 95%乙醇,加入100ml浓磷酸,然后,用蒸馏水补充至200ml,此染液放4℃至少6个月保持稳定。
    2.标准曲线蛋白质样本的准备:尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品,例如测定抗体,可用纯化的抗体作为标准。如果待测样本是未知的,也可用抗体作为标准蛋白。通常在20ug-150ug/100ul之间绘制标准曲线。
    3.将待测样本溶于100~1缓冲溶液中,该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同(最好用PBS)。
    4.按1:5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液,如出现沉淀,过滤除去。
    5.每个样本加5ml稀释的染料结合溶液,作用5~30rain。染液与蛋白质结合后,将由红色变为蓝色,在595nm波长下测定其吸光度。注意,显色反应不得超过30min.
    6.根据标准曲线计算待测样本的浓度。
    注意】:考马斯亮蓝染色法的缺点:
    (1)由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此考马斯亮蓝染色法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差,在制作标准曲线时通常选用g—球蛋白为标准蛋白质,以减少这方面的偏差。
    (2)该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的,但不适用于小分子碱性多肽的定量。还有一些物质干扰此法的测定,如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0.2%影响测定结果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。
    【注意
    我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。
    部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。

    我司所售出产品仅供于科研研究用途,每次销售产品行为都适用于我司网上所列明的通用销售条款。

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