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当前位置: 首页 > 生化试剂 > 荧光标记 > DiD细胞膜荧光探针红色
DiD细胞膜荧光探针红色
DiD细胞膜荧光探针红色
DiD细胞膜荧光探针红色
商品货号:MB6190
CAS 号:V
英文名字:DiD Perchlorate
质量标准:进分
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    规格 库存 发货时间
    10MG [¥400.00]15 现货
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    商品信息

    质检证书(coa)

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    产品简介染料 DiD, DiI, DiO 和 DiR 是一类亲脂性荧光染料家族,用于标记细胞膜和疏水性组织。这是一类环境敏感型荧光染料,当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子(例如蛋白质,虽然在水中其荧光强度很弱)结合时,其荧光强度显著增强。它们具有很高的淬灭系数,偏光依赖性和很短的激发寿命。一旦应用于细胞中,这种染料会在细胞内质膜中逐步扩散,导致在其最佳浓度条件下,将整个细胞膜染色。它们不同的荧光颜色:DiI(橙色荧光)、DiO(绿色荧光)、DiD(红色荧光)、DiR(深红色荧光),为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。
    DiD(红色荧光)可以用来对活细胞进行成像和流式分析。DiD可以用633 nm He–Ne 激光器激发,有着比 DiI 更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。
    基本信息:

    规格

    10mg

    产品形式

    粉末

    Ex (nm)

    644

    Em (nm)

    663

    分子量

    959.91

    溶剂

    DMSO

    产品应用标准实测(由美仑细胞生物学项目组独立完成)
    本品配成 5mM 溶液后为深蓝色液体溶液澄清度且颜色检测无可见异物;然后进行荧光染色检测:工作条件:荧光显微镜,C6 细胞,400×,工作浓度 5μM。
    结果:经细胞膜荧光染色,在40倍物镜下可看到清晰荧光。此浓度下在荧光显微镜下看到的荧光亮度亦足以用于共聚焦检测。


     


    储存条件:-20℃,避光防潮密闭干燥

    操作说明仅供参考 

    1. 染色液制备

    (1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。
    【注】未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融。
    (2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 μM的工作液。
    【注】工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的10倍范围内开始最优浓度的摸索。

    1. 悬浮细胞染色

    (1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。
    (2)37 ℃孵育细胞 2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
    (3)孵育结束,按1000~1500 rpm离心5min。
    (4)倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
    (5)重复(3),(4)步骤两次以上。
    3. 贴壁细胞的染色 
    (1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
    (2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
    (3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
    (4)37 ℃孵育细胞 2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
    (5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸干培养基。
    4. 显微镜检测
    DiD,DiO,DiI,DiR滤光器的选择参见表1。 DiD染色可见红色荧光。
    5.流式细胞仪检测
    经DiD,DiO,DiI,DiR染色的细胞可分别用流式细胞仪的FL1,FL2,FL3或FL4通道检测。

     

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