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NMS-873
NMS-873
NMS-873
商品货号:MB3807
CAS 号:1418013-75-8
英文名字:NMS 873
质量标准:>98%,BR
分子式:C27H28N4O3S2
  • 包装规格:
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    商品信息

    质检证书(coa)

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    NMS-873是特异性p97的变构抑制剂,IC50=30nM,对VCP/p97的选择性相对于对其他AAA ATPase、Hsp90和其他所检测激酶较高。

    相关谱图:

    HNMR

    理化数据

    分子量

    520.67

    化学式

    C27H28N4O3S2

    CAS

    1418013-75-8

    稳定性

    3 years -20°C powder

    溶解性

    DMSO

    100 mg/mL (192.06 mM)

    Water

    Insoluble

    Ethanol

    Insoluble

    生物活性

    产品描述

    NMS-873是特异性p97的变构抑制剂,IC50=30nM,对VCP/p97的选择性相对于对其他AAA ATPase、Hsp90和其他所检测激酶较高。

    特性

    目前为止最有效的特定p97抑制剂。

    靶点

    p97 (Cell-free assay)

    30 nM

    体外研究

    NMS-873降低p97对胰蛋白酶消化的敏感性,防止连接器D2域的退化。NMS-873,作为p97抑制剂,产生对各种血液的和固体肿瘤系的抗增殖活性。作用机制研究表明,NMS-873激活未折叠蛋白反应,干扰自噬,从而诱导癌症细胞死亡。

    实验操作(仅供参考)

    激酶实验:

    生化检测和高通量筛选:
    ATPase活性和重组野生型VCP与其突变体的动力学参数通过检测反应中ADP的形成评估,使用修改的NADH偶联测定法。ADP和NADH是VCP ATPase活性的ATP竞争性抑制剂,NADH偶联测定法的标准协议被修改为两个步骤。在第一部分,ATP产生系统(40 U/ml 丙酮酸激酶和3 mM 磷酸烯醇丙酮酸盐)回收VCP活动产生的ADP,保持底物浓度恒定(因此防止产物抑制),并积累化学计量的丙酮酸盐。在第二部分,VCP酶反应用30 mM EDTA 和250 μM NADH淬灭,并被40 U/ml乳酸脱氢酶以化学计量氧化以减少积累的丙酮酸盐。NADH浓度的减少在340 nm下使用Tecan Safire 2阅读板进行测定。该测试在96孔或384孔UV板上在含有50 mM Hepes,pH 7.5,0.2毫克/毫升BSA,10 mM MgCl2 和 2 mM DTT的反应缓冲液中进行。实验数据符合协同方程式,得到的Ks*大约为60 μM,和希尔系数为2.0 ± 0.1。对1亿化合物库的高通量筛选以1,536孔格式的微型试验进行,并使用更灵敏的ADP检测系统,Transcreener ADP FP。加入10 μM ATP到反应中后,对10 nM VCP 和 10 μM抑制剂预培养20分钟,其在淬灭前允许进行90分钟。

    细胞实验:

    • Cell lines: 各种各样的血液和实体肿瘤系
    • Concentrations: ~10 μM
    • Incubation Time: 72小时
    • Method: 细胞以1,600细胞每孔接种于384孔白色透明底平板。接种后24小时,细胞用化合物(每种化合物,重复两份,稀释成8个不同浓度)进行处理,并在37 °C下于5% CO2大气中再培育72小时。然后将细胞裂解,每孔中ATP含量通过基于热稳定的萤火虫荧光素酶检测,作为细胞活性的量度来确定。IC50值使用处理过的细胞相对于未处理过的对照组的生长百分比来计算
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