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WZ4003
WZ4003
WZ4003
商品货号:MB5268
CAS 号:1214265-58-3
英文名字:WZ4003
质量标准:>98%,BR
分子式:C25H29ClN6O3
  • 包装规格:
    规格 库存 发货时间
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    100MG [¥680.00]15 现货
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    商品信息

    质检证书(coa)

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    WZ4003是高特异性的NUAK kinase抑制剂,细胞试验中作用于NUAK1和NUAK2的IC50分别为20 nM和100 nM,对其他139个激酶没有显著抑制作用。

    相关谱图:

    HNMR

    理化数据

    分子量

    496.99

    化学式

    C25H29ClN6O3

    CAS

    1214265-58-3

    稳定性

    3 years -20°C powder

    溶解性

    DMSO

    7 mg/mL (14.08 mM)

    Water

    Insoluble

    Ethanol

    Insoluble

    生物活性

    产品描述

    WZ4003是高特异性的NUAK kinase抑制剂,细胞试验中作用于NUAK1和NUAK2的IC50分别为20 nM和100 nM,对其他139个激酶没有显著抑制作用。

    靶点

    NUAK1 (Cell-free assay)

    NUAK2 (Cell-free assay)

    20 nM

    100 nM

    体外研究

    在表达野生型NUAK1的HEK-293细胞中,WZ4003 (3–10 μM)显著抑制NUAK1介导的MYPT1磷酸化。此外,WZ4003 (10 μM)抑制MYPT1 Ser445磷酸化以及细胞迁移,入侵和扩散,与在MEFs中基因敲除,或U2OS细胞中抑制NUAK1的的程度类似。WZ4003也对L858R/T790M突变体EGFR表现出高的特异亲和力,同时显著降低含有Ba/F3细胞的T790M 的IC50

    实验操作(仅供参考)

    激酶实验:

    IC50测定:
    活性GST-NUAK1,GST-NUAK1 [A195T]和GST-NUAK2酶利用谷胱甘肽-琼脂糖从HEK-293细胞裂解物中纯化36-48小时,随后哺乳动物的瞬时转染建立表达N端GST标记的 NUAK1,NUAK1[A195T] 或 NUAK2。对缩氨酸激酶试验,使用96孔板,每个反应以一式三份进行。每个反应的总体积为50微升,含有100纳克NUAK1 (野生型或A195T 突变体) 或 NUAK2的 50 mM Tris/HCl (pH 7.5)溶液, 0.1 mM EGTA,10 mM 醋酸镁,200 μM Sakamototide,0.1 mM [γ -32P]ATP (450–500 c.p.m./pmol) 和溶解于DMSO的指示浓度的抑制剂。30°C下培育30分钟后,加入25 mM (终浓度) EDTA与镁螯合以终止反应。然后,将40微升反应混合物点样到P81纸上,并浸入50 mM磷酸中。样品在50 mM磷酸中清洗3次,然后用纯丙酮清洗,并在空气中干燥。[γ -32P]ATP与Sakamototide的整合通过Cerenkov计数定量。该值表达为DMSO对照组的百分比。得出IC50曲线,IC50值使用GraphPad Prism软件计算。

    细胞实验:

    • Cell lines: U2OS 细胞,和 MEFs
    • Concentrations: ~10 μM
    • Incubation Time: 5天
    • Method: 细胞增殖测定在96孔板中使用CellTiter 96 含水的非放射性细胞增殖测定试剂盒,根据制造商说明进行。最初,U2OS 细胞以2000细胞每孔接种,MEFs以3000细胞每孔接种。增殖测定在10 μM WZ4003存在或不存在下进行5天。
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