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凝血酶来源于牛血浆
凝血酶来源于牛血浆
凝血酶来源于牛血浆
商品货号:MB1368
CAS 号:9002-04-4
英文名字:Thrombin from bovine plasma
质量标准:牛来源,比活2000U/mg
  • 包装规格:
    规格 库存 发货时间
    1000U [¥160.00]15 现货
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    凝血酶来源于牛血浆;Thrombin from bovine plasma
    分子量: 37KD
    简介:凝血酶(Thrombin)来源于牛血浆,分子量37KD,是由两条肽链(31KD和6KD)通过二硫键组成的。凝血酶是凝血酶原(凝血因子Ⅱ)激活后形成的蛋白质水解酶,其催化纤维蛋白原(Fibrinogen)水解掉A肽和B肽,由此形成纤维蛋白单体,单体进一步聚合,在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块。
    物理性状及指标
    外观………………………………冻干粉末
    溶解度…………………………… water (10 mg/ml)
    纯度:………………………………SDS-PAGE检测图谱无杂蛋白条带
    湿度:………………………………≤5% w/w
    比活度……………………………>2000 U/mg protein

    冻干粉储存条件:2-8避光防潮密闭干燥

    储液配置及稳定性:

    储备溶液可在0.1%(w/v)BSA溶液中以100单位/ml的浓度制备。储备溶液在0–5°C下保持活性一周。溶液在pH6.5下最稳定,因为pH7>7将大大降低凝血酶活性。由于凝血酶溶液吸附到玻璃上,因此建议将溶液等份放入塑料管中,并在-20°C下储存,以便长期储存。

    产品特点:
    1、纯度高:SDS-PAGE检测图谱无杂蛋白条带;
    2、比活高:比活力大于2000单位/mgpr;可以PK最好的进口产品,目前没有检索到更高比活的国产同类产品;
    3、不含有其他蛋白酶活性;
    4、灭活病毒:生产过程中采用S/D法和干热法两步灭活病毒;
    5、产品稳定性好:冻干产品在室温条件下考察12个月,酶活力未见显著变化,冷藏条件下保存36个月,酶活力未见显著变化;
    6、性价比及其突出,尤其对于工业客户,国内产品的价格,国际顶尖产品质量。
    使用说明:
    (一)融合蛋白切割
    由于凝血酶具有切割序列专一性强,水解效率高的特点,它被广泛地应用于基因工程产品的开发,其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂,尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。
    凝血酶是一种广泛用于切割标签的蛋白酶,能够有效切质量比仅为1:2000的蛋白。切割可在20℃到37℃之间切割0.3到16小时。凝血酶最佳的切割位点是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',这里X4 和 X3 是疏水氨基酸而X1'和 X2'是非酸性氨基酸,一些经常使用的识别位点是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和MY-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之间切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他识别位点是 X2-R[K]-X1', 这里X2 或者 X1'是甘氨酸,例如A-R-G和G-K-A,这里切割发生在第二个残基后。在凝血酶切割位点和N末端标签之间插入五个甘氨酸残基可改善切,通过这一"甘氨酸连接肽"只需较少酶量就可达到完全切割,而且也可以避免可能发生的错误切割。有效的消化缓冲液是20mM Tris-HCl缓冲液,含150mM氯化钠,pH8.0。凝血酶可从切割产物中用p-氨基琼脂糖亲和纯化,或者苯甲脒琼脂糖移去。
    (二)血小板聚集试验
    凝血酶与血小板表面的凝血酶受体结合,活化血小板,使血小板粘附和聚集。
    血小板聚集实验参照文献:兔血用塑料管收集和用ACD(86 mmol/L柠檬酸钠,111 mmol/L葡萄糖,53 mmol/L柠檬酸)0.15体积比抗凝,200 g离心10 min,离心2次,取上清,800g离心15 min。沉淀中加Tyrode—Hepes缓冲液(140 mmol/L NaCl,5 mmol/L KCl,1 mmol/L MgCl2,10 mmol/L Hepes,10mmol/L葡萄糖,pH 7.4)调节至血小板数为(3~4)×1011/L。血小板聚集用血液凝集仪来测定。血小板悬液(0.2ml )与药物温育1 min,然后用凝血酶(500 u/L)作用5 min,记录聚集情况。

    注意
    我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。
    部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。

    我司所售出产品仅供于科研研究用途,每次销售产品行为都适用于我司网上所列明的通用销售条款。

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