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丹诺普韦
丹诺普韦
丹诺普韦
商品货号:MB4305
CAS 号:850876-88-9
英文名字:Danoprevir (ITMN-191)
质量标准:>98%,BR
分子式:C35H46FN5O9S
  • 包装规格:
    规格 库存 发货时间
    2mg [¥780.00]15 现货,一周内发货
    5mg [¥1380.00]15 现货,一周内发货
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    商品信息

    质检证书(coa)

    说明书下载

    Danoprevir (ITMN-191);丹诺普韦     
    分子式:C35H46FN5O9S 分子量:731.83

    简介: Danoprevir 是一种模拟肽类抑制剂,能够抑制 HCV NS3/4A protease。
    别名:丹诺普韦;ITMN-191; R7227; RO5190591; RG7227
    物理性状及指标:
    外观:………………白色至类白色固体
    溶解性:……………DMSO:144 mg/mL (196.76 mM);Water Insoluble;Ethanol:144 mg/mL (196.76 mM)
    含量:………………>98%

    储存条件: -20℃,避光防潮密闭干燥
    生物活性

    产品描述

    丹诺普韦是肽类抑制剂,作用于丙型肝炎病毒(HCV)的NS3/4A protease,IC50为0.2-3.5 nM,抑制HCV基因型1A/1B/4/5/6比抑制2B/3A效果高10倍左右。

    靶点

    HCV NS3/4A蛋白酶

    IC50

    0.2-3.5 nM

    体外研究

    0.29 nM Danoprevir抑制NS3/4A 蛋白酶, 而10 μM Danoprevir 却不能抑制一组79种蛋白酶,离子通道,转运蛋白,及细胞表面受体。Danoprevir与 NS3/4A第一次结合能维持5小时以上,且保持抑制作用状态。Danoprevir (45 nM) 消除病人肝细胞衍生的Huh7细胞衍生的HCV基因型1b复制子,EC50为1.8 nM。含个体突变的HCV 亚基因组复制子细胞系, V36M, R109K, 和V170A 替换不会抗Danoprevir,但是R155K替换则高度抗 Danoprevir。Danoprevir 作用于转染重组病毒的Huh7.5细胞, 显示出抗病原体抑制效果,作用于HCV基因型 1, 4,和 6时,IC50为2-3 nM, 比作用于基因型2/3/5 (280-750 nM)低100倍以上。

    体内研究

    Danoprevir按30 mg/kg剂量处理鼠或猴12小时,使肝脏浓度下降,然后提高Danoprevir浓度,从细胞中消除复制子。

    特征

    Danoprevir丙型肝炎病毒(HCV)的NS3/4A蛋白酶的模拟抑制剂。

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    用途及描述 :科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面,严禁用于人体。本品Danoprevir 是一种模拟肽类抑制剂,能够抑制 HCV NS3/4A protease。可用于相关领域的科研实验。
    储液配置

    1 mg

    5 mg

    10 mg

    1 mM

    1.3664 mL

    6.8322 mL

    13.6644 mL

    5 mM

    0.2733 mL

    1.3664 mL

    2.7329 mL

    10 mM

    0.1366 mL

    0.6832 mL

    1.3664 mL

    50 mM

    0.0273 mL

    0.1366 mL

    0.2733 mL

    经典实验操作(仅供参考)

    激酶实验

    持续荧光反应能量转移(FRET)实验:
    实验buffer含25 μM NS4A肽, 50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 15% (vol/vol)甘油, 0.6 mM月桂基二甲基氨基氧化物, 10 mM二硫苏糖醇, 及0.5 μM 荧光素/QXL520标签的FRET底物{Ac-DE-Dap(QXL520)-EE-Abu-ψ-[COO]-AS-Cys(5-FAMsp)-NH2}. 加入50 pM K2040 酶开始反应。反应在96孔板上黑暗中进行,收集荧光数据。对照组没有抑制剂,有酶参与。分析反应的线性相位计算起始反应率,从而获得IC50值。10 nM NS3/4A 和两倍量Danoprevir 在1×实验buffer中预温育15分钟形成Danoprevir-NS3/4A复合体测定活性。随后,快速稀释复合体,稀释200倍,加到含底物的实验buffer中。对照组条件相同,但是NS3/4A和Danoprevir没有预温育,酶加入复合体反应混合物中,开始反应。此外,对照组没有或NS3。反应进行超过5小时。

    细胞实验

    • Cell lines: 携带HCV复制子的Huh7细胞
    • Concentrations: 5 pM 到100 nM
    • Incubation Time: 48小时
    • Method: 进行抗病原体的实验,接种细胞,梯度稀释的Danoprevir加到含K2040复制子的Huh7细胞中。温育48小时后,提取细胞内 RNA,通过RT-PCR,使用引物 (5’-CACTCCCCTGTGAGGAACTACTG-3’ 和5’-AGGCTGCACGACACTCATACT-3’) 和HCV 5非翻译区的特定探针(5’-6-FAM-CTTCACGCAGAAAGCGTCTAGCCATGG-MGBNFQ-3’, FAM为6-羧基荧光素,MGBNFQ为分子槽沟,结合到非荧光猝火器上) ,且使用ABI Prism 7900 序列检测器系统测定HCV复制子RNA水平。使用TaqMan Gold RT-PCR 试剂进行单管反应。RNA 规格和样本的三次重复反应在50 μL含 5 μL细胞内 RNA (50 ng)的buffer中进行。RT在48oC下进行30分钟,随后在95oC下进行10分子。PCR反应流程如下, 95oC下进行15秒, 60oC下进行1分钟,循环40次。测定每个RNA浓度,做三次平行。根据标准曲线测定复制子RNA的绝对浓度。根据复制子水平测定EC50值。

    动物实验

    • Animal Models: Sprague-Dawley鼠, 食蟹猴
    • Formulation: 用水稀释,鼠实验使用6 mg/mL,猴实验使用 3 mg/mL
    • Dosages: 30 mg/kg
    • Administration: 口服饲喂

    【注意
    我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。
    部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。

    我司所售出产品仅供于科研研究用途,每次销售产品行为都适用于我司网上所列明的通用销售条款。

    http://www.meilune.com/article.php?id=374

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