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3-Methyladenine (3-MA);细胞自噬抑制剂;6-氨基-3-甲基嘌呤
3-Methyladenine (3-MA);细胞自噬抑制剂;6-氨基-3-甲基嘌呤
3-Methyladenine (3-MA);细胞自噬抑制剂;6-氨基-3-甲基嘌呤
商品货号:MB5063
CAS 号:5142-23-4
英文名字:3MA;6-Amino-3-methylpurine
质量标准:HPLC≥98%,autophagy inhibitor
分子式:C6H7N5
  • 包装规格:
    规格 库存 发货时间
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    100MG [¥680.00]15 现货
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    3-Methyladenine (3-MA);细胞自噬抑制剂;6-氨基-3-甲基嘌呤

    分子式:C6H7N5   分子量:149.15

    相关谱图:

    HNMR | HPLC

    产品描述

    3-Methyladenine (3-MA) 是选择性PI3K抑制剂,作用于Vps34 和PI3KγIC50分别为25μM 和 60 μM; 永久抑制I型PI3K, 但对III型 PI3K的抑制是短暂的, 也抑制自噬体的形成。

    靶点

    Vps34

    PI3Kγ

    IC50

    25 uM

    60uM

    体外研究

    3-MA对Vps34轻微的偏向性可能是由于Vps34中某个特异性的疏水环形结构可以环绕在3-MA的3-甲基基团外面造成。据报道对于正常培养和饥饿处理的癌细胞3-MA都能引起细胞死亡。3-MA还可以不通过抑制自吞噬来抑制细胞迁移和入侵,这表明3-MA除了抑制自吞噬之外还有其它生物功能。3-MA可以造成半胱天冬酶依赖的细胞死亡,这一功能与它对自吞噬的抑制无关。用5mM 3-MA处理葡萄糖饥饿Hela细胞可降低gfp-lc3阳性细胞比例至23%。3-MA处理细胞12到48小时内 LC3-I 的水平上升而LC3-II 水平下降。LC3-I转为为 LC3-II 的过程被3-MA抑制了。 2.5 mM 或5 mM 3-MA 处理HeLa 细胞一天并不影响细胞存活率, 而 10 mM 3-MA 处理一天会造成细胞存活率下降25.0% 。 2.5, 5 或 10 mM 3-MA 处理细胞两天分别使细胞存活率下降11.5%, 38.0% 和79.4% 。3-MA 降低细胞存活率的作用具有时间和剂量依赖特性。3-MA 明显缩短nocodazole诱导的前中期阻断时间。3-MA 通过抑制自吞噬来抑制SU11274诱导的细胞死亡。 在野生型MEF细胞中延长 3-MA处理时间 (最多 9 小时)明显造成 LC3 I 到 II 转换。延长 3-MA处理时间会明显增加GFP-LC3的聚集而wortmannin不具有此功能。3-MA介导的LC3 转换和游离 GFP 释放是ATG7依赖的。 3-MA处理会导致 p62 蛋白水平明显升高。即使在Atg5−/− 的MEF细胞中3-MA 也会使p62 水平升高,就像在DOX介导的ATG5缺失的细胞中一样 。3-MA以不同方式抑制 I 型和 III型 PI3K。与野生型细胞相比,在Tsc2−/−细胞中3-MA诱导的 LC3 I 到 LC3 II 转换过程大幅下降。3-MA会破坏mTOR复合物1的拮抗自吞噬功能。

    体内研究

    3-Methyladenine (3-MA)可以通过对磷酸肌醇3磷酸激酶(PI3K) 的作用来阻断自吞噬,而PI3K的活性对于自噬体形成早期膜池的成核和组装是必须的。与SAH 处理组相比3-MA并不会改变出血的程度。与SAH +对照成分组相比经过3-MA预处理后会明显加重神经病学症状。3-MA处理会减少自吞噬发生。相反地,在SAH + 3-MA组里 断裂的半胱天冬酶表达量明显上调,与此一致的是与SAH + 对照成分组相比,SAH + 3-MA组中右脑皮层里原位末端标记阳性细胞数量明显增多。

    溶解性

    DMSO  3mg/ML(加热);Ethanol 3mg/ML; water 5mg/ML(加热)

    稳定性

    2年 2-8°C粉状,6月-80°C溶于DMSO

    实验操作(仅供参考)
    储存液制备

    浓度 /溶剂体积(Water) /质量

    1 mg

    5 mg

    10 mg

    1 mM

    6.7047 mL

    33.5233 mL

    67.0466 mL

    5 mM

    1.3409 mL

    6.7047 mL

    13.4093 mL

    10 mM

    0.6705 mL

    3.3523 mL

    6.7047 mL

    50 mM

    0.1341 mL

    0.6705 mL

    1.3409 mL

    激酶实验

    Protein degradation assay:
    HeLa cells are radiolabeled for 24 hours with 0.05 mCi/mL l-[U- 14C]valine. At the end of the labeling period, cells are rinsed three times with PBS. Cells are incubated for the designated times in either full medium or EBSS with or without the presence of 10 mM 3-Methyladenine.

    细胞实验:

    • Cell lines: HeLa 细胞系
    • Concentrations: 1-10 mM
    • Incubation Time: 3 分钟
    • Method: 用台盼蓝染色法分析细胞存活率(如HeLa细胞)。简言之, 经过3-MA处理后将贴壁的与漂浮的细胞都用PBS( pH 7.4)重悬,密度控制在每毫升1-2×106。加入等体积的0.4% 台盼蓝并彻底混匀。室温孵育3分钟后用血细胞计数器对细胞计数分析。

    动物实验:

    • Animal Models: 体重 300-350 g 的成年雄性Sprague–Dawley 大鼠
    • Formulation: 生理盐水配制
    • Dosages: 400 nM
    • Administration: 脑室给药

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    http://www.meilune.com/article.php?id=374

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