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全国客户服务电话 0411-62910999
重组蛋白表达


哺乳动物细胞瞬时表达服务

服务介绍:
重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。我们可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的蛋白定制服务。
我们拥有达到cGMP标准的百级洁净细胞房,拥有丰富的CHO及HEK293细胞表达经验。
服务优势:

1、美仑生物的哺乳动物细胞蛋白表达技术团队拥有丰富的CHO及HEK293细胞表达经验。

2、哺乳动物瞬时表达系统以HEK293细胞和CHO细胞为表达宿主。

3、高成功率:我们会分析您的蛋白/抗体基因序列,结合自主研发高表达载体,实验成功率>95%。

4、我们专有的高密度(High Density, HD哺乳动物瞬时表达技术,以及优化的表达方案和培养基,确保蛋白和抗体产量达到g级水平。

5、我公司哺乳动物表达系统可实现复杂糖基化修饰,蛋白活性更高。

6、可实现瞬时转染表达,蛋白、抗体的快速小量制备。

7、具有完备的检测平台,如Elisa(酶联免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝胶电泳、Western Blot(蛋白质免疫印迹)等检测平台,可对蛋白的浓度、纯度、活性等多项性能进行评估。

8、我们实行专人专项管理制度,即在整个项目期间,每个不同的实验阶段,都有相关人员与客户进行对接,始终保持与客户间的沟通,保证项目进展的透明化。

9、通过分步报价、按节点收费的方式,全面降低客户的风险,极大程度上节约了客户的成本。

10、具有一定的灵活性,我们可根据客户的不同需求,提供不同的实验方案,尽最大的努力满足客户的要求。

服务内容:

主要流程

时间

内容

交付内容

基因合成及密码子优化

1-2周

客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。


目标基因亚克隆到哺乳动物细胞表达载体

1-2周

1.克隆至表达载体
(可选择的表达载体,pcDNA3.1等真核表达载体)
2.质粒测序
3.质粒制备

测序报告(若客户要求)

小量转染并通过Western Blot检测表达

2-3周

1.瞬时转染HEK293/CHO细胞
2.蛋白纯化
3.QC分析 (SDS-PAGE,UV等)

1. 0.1-0.5mg纯化蛋白样品
(如蛋白表达可行)
2. 质量检验报告 (CoA)

目标蛋白表达及纯化

6-8周

目标蛋白的再加工及详细检测

筛选稳定高效的细胞株

周期将延长



大量表达、纯化及检测(可选)

3-8周

100mg或更多蛋白
QC检测

1.纯化蛋白
2.质量检验报告 (CoA)

服务报价:15000元+(不含载体构建)


毕赤酵母(P.pastoris)表达服务


服务介绍:
重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。我们可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的蛋白定制服务。
毕赤酵母蛋白表达服务,会从目的基因的特性,基因剂量,整合位点,以及宿主选择,转化子表型和培养条件等多方面入手,再通过文献查阅,密码子分析,蛋白表达系统条件优化等途径生产出高纯度蛋白。
服务优势:

1、美仑生物具有丰富的酵母蛋白表达经验,已成功表达出多种重组蛋白。

2、我公司具有筛选酵母表达高拷贝菌株的服务,可以满足客户的多种特殊需求。

3、我公司利用酵母表达系统成功表达过具有二硫键蛋白及糖基化蛋白,使蛋白具有类似天然的结构和翻译后修饰,保证了蛋白的活性。

4、酵母系统表达的过程中,对诱导时间及温度的控制,对培养条件和菌株生长周期的把握直接影响到重组蛋白表达的成败,美仑生物的技术人员对整合流程把握和控制,提高表达的成功率及表达水平。高生产率:分泌信号序列保证了重组蛋白的大分泌量。

5、我公司可提供两种表达体系:可选择组成性表达或者诱导表达两种体系。

6、我公司具有多种菌株和载体可供选择:我们提供包括X33, GS115等多种菌株和多种载体。

7、可进行大规模生产,高达200L的生物反应器保证克级水平蛋白的生产。

8、我公司具有完备的检测平台,如Elisa(酶联免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝胶电泳、Western Blot(蛋白质免疫印迹)等检测平台,可对蛋白的浓度、纯度、活性等多项性能进行评估。

9、我们实行专人专项管理制度,即在整个项目期间,每个不同的实验阶段,都有相关人员与客户进行对接,始终保持与客户间的沟通,保证项目进展的透明化。

10、通过分步报价、按节点收费的方式,全面降低客户的风险,极大程度上节约了客户的成本。

服务内容:

主要流程

内容

时间

交付内容

基因合成及密码子优化

客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。

1-2周


目标基因的亚克隆及
P.pastoris表达菌株电转化

1.克隆至合适的表达载体
(可选择的表达载体:pPICZα-A、pPIC9、pPIC9K、pPIC3.5K)
2.质粒测序
3.质粒制备

1-2周

测序报告(若客户要求)

P.pastoris表达菌株筛选

酵母表达初筛

3-4周

1.1-3mg蛋白
2.表达评估报告

酵母表达菌株鉴定
(可选菌株:X33、GS115)

 

P.pastoris表达菌株表达优化

酵母蛋白表达纯化
(根据蛋白表达情况,选择合适的纯化方式)

3-4周

大量表达及纯化(可选)

更多蛋白
QC检测

3-8周

1.纯化蛋白
2.质量检验报告 (CoA)

服务报价10000元+(不含载体构建)


杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务

服务介绍:
重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。我们可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的蛋白定制服务。
杆状病毒表达系统(baculovirus expression vector system,BEVS)是当今基因工程四大表达系统之一。BEVS属于真核表达系统,通过BEVS得到的重组病毒易于筛选、具有翻译后修饰功能、表达外源基因的效率较高。BEVS还可以同时表达多个外源基因,在分泌蛋白生物活性的同时增加产量。因此,BEVS在科研和工业生产中通常应用于大规模重组蛋白的制备。
服务优势:

1、高效性:我们的系统基于最新的技术,保证胞内或者分泌的重组蛋白的高水平表达。具有易于表达异源多聚体蛋白、安全性高等特点,重组表达的蛋白产品具有正确的翻译后修饰和生物学活性,如二硫键的形成、磷酸化、糖基化等。

2、我公司昆虫表达系统可表达分子量较大的外源性基因(最高可达200kD),适合大分子蛋白的表达;最高表达量可达昆虫细胞蛋白总量的50%。

3、多种昆虫动物细胞Sf9,Sf21及其它昆虫细胞系可供选择。

4、昆虫表达系统比哺乳动物细胞表达系统操作简单。

5、一站式解决方案,从基因合成到蛋白表达纯化。

6、重组蛋白生物活性高,表达水平高,能同时表达多个基因。

7、可添加信号肽,促进蛋白更易纯化。

8、相对哺乳动物细胞表达系统成本低。

9、具有完备的检测平台,如Elisa(酶联免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝胶电泳、Western Blot(蛋白质免疫印迹)等检测平台,可对蛋白的浓度、纯度、活性等多项性能进行评估。

10、我们实行专人专项管理制度,即在整个项目期间,每个不同的实验阶段,都有相关人员与客户进行对接,始终保持与客户间的沟通,保证项目进展的透明化。

11、通过分步报价、按节点收费的方式,全面降低客户的风险,极大程度上节约了客户的成本。

12、具有一定的灵活性,我们可根据客户的不同需求,提供不同的实验方案,尽最大的努力满足客户的要求。

服务内容:

主要流程

时间

内容

交付内容

基因合成及密码子优化

1-2周

客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。


目标基因亚克隆到pFastBac供体质粒

1-2周

1.克隆至表达载体
2.质粒测序
3.质粒制备

测序报告(若客户要求)

制备重组杆状病毒Bacmid DNA

2-3周

1.病毒包装
2.病毒扩增


目的蛋白的表达纯化

2-4周

1.病毒侵染细胞
2.小量表达、纯化及条件优化
3.QC分析 (SDS-PAGE,UV等)

1. 0.1-0.5mg纯化蛋白样品
(如蛋白表达可行)
2. 质量检验报告 (CoA)

大量表达、纯化及检测
(可选)

3-8周

100mg或更多蛋白
QC检测

1.纯化蛋白
2.质量检验报告 (CoA)

服务报价:20000元+(不含载体构建)

大肠杆菌(E.coli)表达系统服务

服务介绍:
重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。我们可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的蛋白定制服务。
原核表达系统是通过原核生物来获得外源蛋白的体系。原核表达是目前常用的重组蛋白表达方式之一,操作相对简便,要求较低。相对哺乳动物表达系统更加经济节约。
服务优势:

1、美仑生物拥有丰富的大肠杆菌可溶性蛋白表达、纯化及蛋白变复性经验。

2、我公司拥有多种E. coli细胞株和表达载体,满足特定蛋白质胞内表达及周质空间分泌表达需求。也可利用SUMO、GST、Trx及NusA等促融标签解决蛋白自身疏水性造成不可溶表达问题。提供从密码子优化到重组蛋白表达、纯化的一站式服务以及标签去除、内毒素去除等附加服务,以满足不同的定制需求。

3、针对于有些外源基因在大肠杆菌中重组表达会形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白质的包涵体的情况,我们会进行表达系统优化,尽量降低形成包涵体的几率。

4、我们会通过评估确定复性条件,进行温和的包涵体变复性。

5、我们提供的复性蛋白纯度在95%以上。对于客户要求切除标签的情况,我们可以做到切标签不留残基。

6、我们具有特色的低温诱导表达体系,提高了蛋白可溶表达几率,增加了表达成功和蛋白产物的活性概率。可为客户提供优质的原核蛋白表达服务。

7、可进行大规模生产。

8、具有完备的检测平台,如Elisa(酶联免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝胶电泳、Western Blot(蛋白质免疫印迹)等检测平台,可对蛋白的浓度、纯度、活性等多项性能进行评估。

9、我们实行专人专项管理制度,即在整个项目期间,每个不同的实验阶段,都有相关人员与客户进行对接,始终保持与客户间的沟通,保证项目进展的透明化。

10、通过分步报价、按节点收费的方式,全面降低客户的风险,极大程度上节约了客户的成本。

服务内容:

主要流程

时间

内容

交付内容

基因合成及密码子优化

1-2周

客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。


载体构建

1-2周

1.克隆至合适的表达载体(可选择的表达载体以pET和pGEX系列为主)
2.质粒测序
3.质粒制备

测序报告(若客户要求)

表达鉴定及可溶性分析

1-2周

1.10mL培养
2.3个表达条件尝试
3.表达菌株的选择
4.蛋白表达评估 (SDS-PAGE)

表达评估报告

放大表达和1-2步纯化

1-2周

1.蛋白纯化 (可溶表达)
2.蛋白变性复性纯化 (包涵体)
3.QC分析 (SDS-PAGE,UV等)

1.0.5-1mg纯化蛋白样品
(如蛋白表达可行)
2.质量检验报告 (CoA)

大量表达及纯化(可选)

2-8周

1.100mg或更多蛋白
2.QC检测

1.纯化蛋白
2.质量检验报告 (CoA)

附加项订购信息

时间

内容

交付内容

蛋白去内毒素

1-2周

去除蛋白内毒素

质量检测报告(CoA)

服务报价:8000元+(不含载体构建)