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全国客户服务电话 0411-62910999
蛋白检测



 一、蛋白质印迹(WB)技术服务:

蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法,是将聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后的蛋白质从凝胶中转移至固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术。

技术服务优势:

1、在保证图片结果美观的同时,保证实验结果准确,同批次样品,至少做两次实验结果验证。
2、操作人员,有10年以上WB实验操作经验,实事求是,确保结果准确。
3、公司硬件设施齐全,电泳凝胶成像设备全部为进口品牌,全部实验公司内部完成,严格遵守商业保密规定,按时保质完成客户的各项委托。

实验内容:

客户前期准备

服务项目明细

样品种类

样品量

需要准备的物品

蛋白提取、蛋白定量、免疫印迹。

细胞样品

≥5×106

●请提供待检测的样品,以及检测蛋白所需的一抗

动物组织样品

≥50mg

交付内容及说明

交付内容

服务说明

电子版数据 (包括检测报告、western 结果图、灰度分析图等)

1. 收到样品后,会进行预实验,如检测结果与我们要求不符,将停止试验并收取预实验相关费用。
2.实验费用及周期是针对正常实验样品制定的,样品特殊或样品多时除外
3.一组样品总数为8个以下(含阴性对照)。

报价及周期

服务项目

报价

服务周期(不含快递时间)

蛋白提取

25元/样

20个工作日

Western blotting(含内参二抗,不含一抗)普通蛋白

450元

Western blotting(含内参二抗,不含一抗)磷酸化蛋白

650元


二、ELISA技术服务

ELISA,即酶联免疫吸附实验,是利用抗原或抗体在聚苯乙烯微孔板上固相化和抗原或抗体酶标记的技术,利用抗原抗体的特异性结合原理,来验证目标抗原或抗体量的多少。我公司ELISA团队已参与开发多种商品化ELISA检测试剂盒,对间接法、夹心法、竞争法ELISA都可熟练应用。我公司配备有进口多功能酶标仪和高性能化学发光检测仪器,保证检测结果准确。


客户前期准备

客户需提供检测用试剂盒或待检用抗体和包被用抗原。客户提供含待测样品的标本,相关样品的采集方法及注意事项可以与我公司技术人员沟通,样本类型和要求如下表:


样本类型

样本要求

细胞培养上清

离心去沉淀,收集上清,样本量>500μl。

组织匀浆

建议液氮研磨,加入蛋白酶抑制剂,样本量>500μl。

细胞匀浆

建议加入蛋白酶抑制剂,样本量>500μl。

血清、血浆

运输:加在缓冲液中(蛋白裂解液)低温运输,样本量>500μl。

其他类型样品

避免反复冻融,样本量>500μl。

ELISA检测参考价格及项目周期

服务项目

服务时间

报价

服务内容

交付结果

ELISA检测

1-2周

260元/板

提供间接法ELISA、夹心法ELISA和竞争法ELISA的定性和定量测定。

原始数据;数据分析结果;实验报告包括实验环境条件、所用仪器设备型号、标准曲线分析、样本浓度,可直接用于论文撰写;


三、免疫共沉淀(Co-IP)技术服务:

免疫共沉淀可对两种已知蛋白是否存在相互作用进行验证,也可以验证在总蛋白中是否含有与已知蛋白相互作用的未知蛋白。其实验方法为将靶蛋白A与目的蛋白B进行孵育,形成“靶蛋白-目的蛋白”复合物。将靶蛋白的特异性抗体与复合物共孵育,形成“抗体-靶蛋白-目的蛋白”复合物,利用ProteinA/G纯化。通过结合western blot及质谱检测等对两种蛋白之间是否存在相互作用进行定性分析。



客户前期准备

样本类型

样本要求(细胞、组织、蛋白样本)

细胞样本

细胞悬液或贴壁细胞:每份样本至少 2×107 细胞,在运输前将培养液充满整个容器,25T细胞瓶常温运输。

冻存细胞:收获培养的细胞后,离心去除培养液,PBS洗2次,立即置液氮中快速冷冻。液氮冷冻半小时后,保存于-80°C冰箱,干冰运输。提供量至少 2×107 细胞。

组织样本

组织样品预处理: 采集新鲜组织,组织块以PBS或生理盐水清洗干净,切为小块,放入液氮或-80°C冰箱中保存。提供量动物组织>400mg/样本,植物组织>2g/样本。

运输:干冰运输。

蛋白样本

1. 裂解样品总蛋白量>2ml/样品;细胞样品总蛋白浓度>1mg/ml;组织样品总蛋白浓度10-15mg/ml。在实验前会进行质检,以保证其质量达到实验要求;
2. 在提取总蛋白时,加入蛋白酶抑制剂和磷酸蛋白酶抑制剂(尤其对于检测磷酸化蛋白)。

运输:加在缓冲液中(蛋白裂解液)低温运输。

客户提供一抗

运输:依据说明书,一般4°C或-20°C运输,严禁反复冻融。

免疫共沉淀(Co-IP)价格及项目周期

服务项目

服务时间

价格

服务内容

交付结果

免疫共沉淀

4-5周

4500元/样

Co-IP, Western blot鉴定Co-IP实验产物

实验报告,原始实验数据

质谱检测

4-5周

3000元/样

质谱鉴定和验证Co-IP实验产物

质谱鉴定结果