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新品播报丨美仑自主研发细胞冻存液【通用型】
2018-11-30  来源:大连美仑生物技术有限公司

让细胞乖乖的“死去活来”

主宰细胞之“命运神器”

 

 

美仑货号:MA0205

中英名字:通用细胞冻存液(Liquid Cryopreservation Medium) 

规格价格:50ML [¥220.00]

 

 

新品首发,惊艳登场

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 01 关于细胞冻存 

       细胞冻存是细胞保存的主要方法之一,利用冻存技术将细胞用冻存液重悬后置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用DMSO作保护剂,能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。

 02 产品描述 

       美仑通用细胞冻存液 (Liquid Cryopreservation Medium) 是一种即用型的培养细胞低温冻存液,适用于绝大部分的哺乳动物原代细胞、传代细胞系和杂交瘤细胞等的冻存保种。本产品可以用于大约50管细胞的冻存(注:按照常规情况冻存1管细胞使用1ml冻存液计算)

产品优势

○ 通用型细胞冻存液(适用于各类细胞)

○ 本产品的主要成分是进口DMEM高糖培养基、进口优质胎牛血清和细胞培养级DMSO等;

○ 采用优化的成分配比,经无菌处理,可直接使用。

○ 操作便捷,储存稳定,复苏后细胞存活率高。

保存条件

○ -20℃保存,有效期1年。

注意事项

○ 1.使用前请在2~8℃将细胞冻存液完全融化混匀,并置于2~8℃预冷备用。

○ 2.长期保存请置于-20℃保存,短期使用可置于2~8℃保存至少1个月。

○ 3.若发现少量沉淀,可能是有少量的蛋白析出,为正常现象,不影响冻存效果。

○ 4.请确保冻存前细胞处于对数生长期,并且存活率大于90%。

○ 5.复苏时,若不需立即去除冷冻保存剂,则可在解冻后直接将细胞悬液加入到预热好的完全培养基中进行培养,次日进行换液。

○ 6.冻存的细胞要定期复苏,检查细胞的活性;冻存的杂交瘤细胞还要定期检测分泌抗体的稳定性。在液氮中储存的细胞可以长时间进行保存,如果置于-80℃储存,保存时间大约为一年。

○ 7.请注意细胞冻存和复苏过程中无菌操作 。

○ 8.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作指南

○ 请参考说明书

 

 03 细胞冻存与复苏小贴士 

       为了将每一种有生命的细胞较好的保存其原有的细胞特性或者长久的保存种质资源,实验人员往往将细胞用细胞冻存液保存于-196℃的液氮,使得细胞暂时脱离生长状态,等到实验需要的时候再从液氮中取出复苏应用。在这一看似神奇的生命存储过程中,是如何实现的呢?

1、冷冻越慢越好,复苏越快越好

       在高端的实验室可以使用程序冷冻仪。一切由机器代劳,十分便捷。需要注意的是,细胞冷冻越慢越好,宁慢勿快。做细胞冷冻前,事先留出充足的时间。

       而复苏速度越快越好。从液氮罐里取出来之后,迅速放在37°C水浴中,然后快速摇晃。令其尽快融化。

2、高高兴兴实验,平平安安科研

       细胞冻存和复苏是细胞培养技术里面最容易出事的部分。凡是和液氮接触的操作,注意戴保护眼镜和手套。最需要小心的是:复苏的时候,在水浴中快速摇晃的时候。有时候小瓶会爆炸。另外,一般的冻存液中的DMSO是有毒致癌的,所以,接触的时候一定一定要带好手套,注意安全。

3、冻存细胞数量要足够

       无论再怎么小心,由于各种不可预测的因素,细胞在冷冻和复苏过程中总会死掉一部分的。所以,一开始冻存细胞的数量要足够。一般最低要达到5×106/毫升,一瓶不够两瓶凑。但是,这个不能一概而论。有些细胞,比如杂交瘤细胞,只需要1-3x106/毫升。

4、做好标记

       把培养瓶放入提手,末端应该扎有小牌,注明主人的名字,细胞名称和冻存日期。还要在每个冻存管上写上细胞名称,代数和冻存日期。

5、细心呵护

       刚刚复苏的细胞就像刚刚出生的婴儿,非常脆弱。需要我们的细心呵护。培养液要事先在培养箱或者水浴中复温。一切的和细胞接触的动作都要轻柔。把细胞从冻存管里吸出来,注入离心管,要轻轻地吸取和滴加。包括给离心管补加培养液的时候,都要轻轻地滴加。离心要用低速离心(500-1000转/分钟)。吹打要用专用的吹打管,不要图方便用移液枪,吹打也要轻轻的。

6、DMSO的疑问

       上面提到了DMSO是一种有毒致癌物质。那么,解冻之后,应不应该去除冻存液中的DMSO呢?答案是no。除了极少数特别注明的对DMSO敏感的细胞外,99%的细胞都不需要去除DMSO。解冻后的频繁换液会慢慢去除掉DMSO的。

7、物离乡贵,人离乡贱

       解冻后的细胞要用和以前一样的培养基和血清,培养基的选择非常重要。因为每一种细胞都有自己特定的,并且已经熟悉了的生长环境。突然使用不一样的培养基和血清,会造成细胞生长不良,甚至死亡。这和一个人突然离家千里,会水土不服是一样的道理。

 

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