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高手进阶

一、细胞培养基础知识培训

1、细胞培养概述

2、细胞培养所需设备与培养用液

3、培养细胞的生物学特征

4、原代培养与传代培养、冻存与复苏

5、细胞培养常见问题及解决方法

详情请下载 细胞培养基础知识培训


二、细胞凋亡与增殖检测知识培训

01 细胞增殖与活力检测
膜损伤检测
代谢活性检测
DNA合成检测
荧光标记检测
目录 ATP水平测定

02 细胞凋亡与增殖检测
磷酯酰丝氨酸外翻检测
线粒体膜电位检测
DNA片段化检测
Caspase活性检测
荧光标记细胞形态检测

详情请下载 细胞凋亡与增殖检测知识培训


三、荧光素酶报告基因基础知识培训
报告基因系统广泛应用于真核生物基因表达和细胞生理学研究,包括受体活性、转录因子、细胞信号转导、mRNA加工和蛋白质折叠等。“双报告基因”通常被用来提高实验精确度,即在一个系统中同时表达和测量两个独立的报告基因。一般来说,实验组报告基因与具体实验条件的影响是相关的,而共同转染的内对照组报告基因则是用来充当校正参数,作为内参提供反应基线。将实验组的结果与内对照组的结果进行约化处理,可降低由细胞存活率或转染效率的差异而导致的结果波动,同时还可消除由取样体积、细胞裂解效率和仪器测定引起的实验误差。因此,双报告基因检测可以通过减少外部影响来获得更可靠的实验数据。应用于启动子活性检测、miRNA靶基因验证 (针对3’UTR元件),本文就报告基因种类,特点,检测原理等进行介绍。
详情参见双酶报告基因基础知识培训

四、细胞蛋白荧光标记知识培训
许多类型的荧光试剂相继被开发用于细胞染色,化学标记蛋白质、核酸和其他生物分子。当特定抗体或纯化的生物分子被荧光染料化学标记后,它们就成为检测靶抗原的荧光探针,可被应用于细胞成像、高通量分析、流式细胞术、western blotting和ELISA等。Meilunbio®可为您提供广泛的荧光试剂产品包括细胞标记,蛋白标记,其他荧光染料等。本文就如何进行细胞标记、蛋白标记,从其原理及操作进行了介绍,并阐述了常见问题的应对措施。

详情参见细胞蛋白荧光标记知识培训


五、蛋白提取基定量础知识

蛋白质参与生物体内几乎所有的生命活动,对蛋白质的研究有助于揭示生命活动现象和分子生物学机理,蛋白质的提取是研究蛋白质的第一步,通常是提取特定组织细胞中的总蛋白,或是处于细胞特定位置的蛋白质,蛋白质提取实验的成败,直接影响后续的蛋白质检测和提纯等实验操作。 蛋白质的精确定量是蛋白质相关实验所必需的,蛋白质定量可以分为总蛋白定量和单种蛋白定量,总蛋白定量分析有多种不同方法,包括紫外吸光值检测法、Lowry检测法、BCA检测法和Bradford检测法等。单种蛋白定量主要包括酶联免疫吸附实验(ELISA),Western blot和质谱分析等。详情请参考蛋白提取定量新手上路


六、蛋白电泳及免疫印迹基础知识培训

电泳是带电颗粒在电场作用下向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象,而聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳是带有电荷的蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶的介质中向其所带电荷相反的电极移动,又因为聚丙烯酰胺凝胶孔径的关系,使不同分子量的蛋白质分离开。按照制备凝胶的支持物形状和电场方向可分成多种不同的电泳技术,本文主要讲述使用最广泛的垂直平板凝胶电泳,这种电泳的优点是可以在同一条件下,在同一凝胶中对多种样品进行电泳。

蛋白免疫印迹,也称为Western blotting,是从多种复杂蛋白质中检测目的蛋白质的一种方法,这种技术诞生于20世纪70年代,由Towbin等人发明了该项技术,现在已经成为蛋白质分析的常规技术。该实验流程是将处理好的蛋白样品依据蛋白质的分子量、电荷数和等电点等性质对其进行电泳分离,然后转移到固相载体上,再利用抗体和抗原之间的特异性结合的原理,通过抗体(一抗)识别所要研究的蛋白质,然后用能够与一抗特异性结合的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般会偶联能够检测的酶,通过对酶浓度的检测,从而对目的蛋白质进行定性或半定量实验。综上所述,免疫印迹可以分为两个步骤:一是蛋白质由凝胶转移至固相载体;二是对目的蛋白的特异性检测。

请参考蛋白电泳免疫印迹基础知识培训


七:实验动物模型基础知识
实验动物模型制作原则
实验动物用药量的计算
实验动物给药方法
常见疾病模型造模方法
请参考实验动物模型基础知识

八:信号通路研究方法策略基础知识
信号蛋白表达水平分析
信号蛋白在细胞内定位
关键信号分子抑制或增强
请参考信号通路研究方法策略基础知识